【生物】河北省保定市定兴中学2019-2020学年高二下学期第二次月考（4月线上测试）试题（解析版）
河北省保定市定兴中学2019-2020学年
高二下学期第二次月考（4月线上测试）试题
注意事项：
1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息
2．请将答案正确填写在答题纸上
第I卷（选择题)
一．选择题（共30个小题，每题2分，共60分）
1．下列有关果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是
A．参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体
B．果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋
C．在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白酶的微生物参与
D．在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐量
2．下列有关果醋制作的原理的说法不正确的是
A．果醋制作利用的是醋酸菌，它是一种能进行有氧呼吸的原核生物
B．当糖源不足时，醋酸菌先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸
C．当氧气和糖源充足时，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸
D．实验表明，醋酸菌对氧气的含量不是很敏感，可以短时间内中断通气
3．下列说法错误的是
A．因土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离
B．在统计菌落数目时，为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数
C．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同
D．牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
4．下列实验流程或操作中，错误的是
A．挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵（果酒）→醋酸发酵（果醋）
B．土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落
C．制备MS固体培养基→外植体消毒→接种→移栽→培养→栽培
D．胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→鉴定
5. 超氧化物歧化酶（SOD）是一种源于生命体的活性物质，在生活实践中有非常重要的应用价值。下图为人工培育含SOD植物新品种的过程，相关叙述正确的是
A. ①过程中最常用的方法是采用显微注射技术将SOD基因导入植物细胞
B. ②、③分别表示脱分化、再分化，两个过程需要在严格无菌操作的条件下
C. SOD催化O2形成H2O2的机制是为该反应提供活化能
D. 该育种方式利用的是细胞工程技术，能体现细胞的全能性
6．在植物有效成分的提取过程中，常用蒸馏法，压榨法和萃取法，下列关于这三种方法的叙述错误的是
A．蒸馏法的实验原理是利用水将芳香油携带出来，再把水蒸发掉，剩余的就是芳香油
B．压榨法的实验原理是通过机械加压，压榨出植物的芳香油
C．萃取法的实验原理是使芳香油溶解在有机溶解中，蒸发掉有机溶剂后就可以获得芳香油
D．蒸馏法适用于提取玫瑰油、柠檬精油等挥发性强的芳香油
7．胡萝卜素可用于治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，下图是提取胡萝卜素的实验流程示意图，相关说法正确的是
→→→→→→
A．图中干燥处理时的温度越高、时间越长越利于胡萝卜素提取
B．图中甲过程表示萃取，此过程用到的有机溶剂具有较高的沸点，并能充分溶解胡萝卜素
C．图中乙过程表示浓缩，浓缩之前进行过滤的目的是除去萃取剂
D．只能从植物中提取天然-胡萝卜素
8．如图为科研人员分别用6种不同的有机溶剂（编号为1～6）按相同的实验步骤从枸杞中提取类胡萝卜素，得到的类胡萝卜素的含量如图所示，下列叙述错误的是
A．该实验的自变量为六种有机溶剂中类胡萝卜素的含量
B．“按相同的实验步骤”是为了排除无关变量的干扰
C．实验课题为探究6种有机溶剂对枸杞中类胡萝卜素提取量的影响
D．以有机溶剂作为提取剂是因为类胡萝卜素易溶于有机溶剂
9．下图是提取橘皮精油的实验流程图,下列有关叙述不正确的是
①石灰水浸泡→②漂洗→③压榨→④过滤→⑤静置→⑥再次过滤→橘皮油
A．石灰水浸泡能破坏细胞、水解果胶，能提高出油率
B．压榨液中需分别加入相当于橘皮质量0.25%的碳酸氢钠和5%的硫酸钠
C．过程⑥的目的是除去少量水分和蜡质等杂质
D．过程⑥之前要进行离心
10．在玫瑰精油和橘皮精油提取过程中，正确的是
A．玫瑰精油和橘皮精油都可用蒸馏、压榨和萃取的方法提取
B．在水蒸气蒸馏出的玫瑰乳浊液中加入Na2SO4的作用是降低玫瑰油的溶解度，利于油水分离
C．在较高温度下延长蒸馏时间有利于充分提取玫瑰精油
D．盛花期的玫瑰花含油量最高，最适用于提取精油
11．为增加玉米抗旱性，研究者构建含有某微生物抗旱基因E的重组质粒，采用农杆菌转化法转入玉米幼胚组织细胞中，用E蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交检测后，经进一步鉴定，筛选出抗旱的转基因玉米。下列相关叙述不正确的是
A．提取该微生物mRNA反转录为cDNA，通过PCR可获得大量目的基因
B．用E蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交，可在分子水平检测转基因玉米的抗旱性状
C．用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞需要严格无菌操作
D．将重组质粒置于经CaCl2处理的农杆菌悬液中，可获得转化的农杆菌
12．为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不符的是
A．用DNA分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上
B．用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞
C．在培养基中添加潮霉素，筛选被转化的菊花细胞
D．用限制性核酸内切酶 BamH I和DNA连接酶构建重组质粒
13．下图是某转基因抗虫水稻培育流程图,下列有关分析错误的是
A．④过程依据细胞的全能性原理
B．毒蛋白基因的获得需要限制酶
C．①过程所依据的理论基础之一是DNA分子结构的相似性
D．该基因工程成功的标志是毒蛋白基因在宿主细胞中稳定维持其遗传特性
14．下列有关基因工程的叙述，正确的是
A．DNA连接酶只能将由同一种限制性核酸内切酶切割而成的黏性末端连接起来
B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因重组
C．目的基因与质粒结合的过程发生在细胞内
D．常使用的载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等
15．如图所示，hok基因位于大肠杆菌的R1质粒上，能编码产生一种毒蛋白，会导致自身细胞裂解死亡，另一基因sok也在这个质粒上，转录产生的sokmRNA能与hokmRNA结合，这两种mRNA结合形成的产物能被酶降解，从而阻止细胞死亡。下列说法合理的是
A．sokmRNA和hokmRNA碱基序列相同
B．sokmRNA存在并不影响hok基因的转录
C．当sokmRNA和hokmRNA都存在时，大肠杆菌细胞
会裂解死亡
D．两种mRNA结合形成的产物能够表达相关酶将其分解16．基因工程和蛋白质工程的区别是
A．基因工程合成自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程可制造一种新的蛋白质
B．基因工程在分子水平操作，蛋白质工程在细胞水平（或性状水平）操作
C．基因工程需对基因进行操作，蛋白质工程不对基因进行操作
D．蛋白质工程与基因工程没有任何联系
17．下图为利用生物技术获得生物新品种的过程，有关说法错误的是
A．A→B过程中一般用4种脱氧核苷酸为原料，并加入两种引物
B．B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是受精卵
C．A→B过程利用了DNA（双链）复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶和解旋酶
D．B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法
18．下列有关基因工程的成果及应用的说法中，正确的是
A．用基因工程的方法培育出的抗虫植物不能同时抗病毒
B．用转基因动物作为器官移植的供体时，导入的是调节因子，不是目的基因
C．基因工程在农业上的应用主要是培育具有抗逆性的农作物
D．目前，在发达国家，基因治疗已用于临床实践
19．下图表示通过基因工程培育抗虫棉时，从苏云金芽孢杆菌中提取抗虫基因“放入”棉花细胞中与棉花的DNA分子结合起来而发挥作用的过程示意图。以下说法正确的是
A．该技术中的四步操作均用到了碱基互补配对原则
B．目的基因在抗虫棉中的遗传要遵循基因的分离定律
C．图中Ⅰ为质粒，从大肠杆菌中获取后需经过加工才能作为运载体使用
D．剔除培育成功的抗虫棉体内的四环素抗性基因会影响抗虫基因的表达
20．科研人员以抗四环素基因为标记基因，通过基因工程的方法让大肠杆菌生产鼠的 β-珠蛋白，治疗鼠的镰刀型细胞贫血症。下列相关实验设计中不正确的是
A．用 β-珠蛋白基因的编码序列加启动子、终止子、抗四环素基因等元件来构建表达载体
B．利用小鼠的成熟红细胞提取 mRNA，再经逆转录可获得 β-珠蛋白基因的编码序列
C．用含有四环素的培养基筛选出能繁殖的大肠杆菌，不一定能产生β-珠蛋白
D．用 Ca2＋处理大肠杆菌后，将表达载体导入不具有四环素抗性的大肠杆菌中
21．研究者将苏云金芽孢杆菌(Bt)的Cry1Ab基因导入水稻细胞培育成抗螟虫的克螟稻，克螟稻与普通水稻杂交，子代抗螟虫与不抗螟虫的比例为1:1。下列有关叙述正确的是
A．克螟稻的培育说明不经过地理隔离也能产生新物种
B．获取Cry1Ab基因需使用限制酶和DNA连接酶
C．Cry1Ab基因已整合到克螟稻细胞的染色体上
D．克螟稻降低了农药的使用量，害虫不会出现抗药性
22．如图所示为农作物新品种的育种方式，相关叙述错误的是
A．②③过程分别称为脱分化和再分化
B．①过程代表去壁、诱导原生质体融合、再生出新的细胞壁
C．⑤过程中用的载体只能是质粒
D．图中育种方式突出优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍
23．下列关于植物组织培养的表述，错误的是
A．愈伤组织是一团不具有特定结构和功能的薄壁细胞
B．培养应在无菌条件下进行
C．以花粉组织培养可得到单倍体植株，即单倍体育种过程
D．不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同
24. 将某种酶运用到工业生产前，需测定使用该酶的最佳温度范围。下图中的曲线①表示在各种温度下该酶活性相对于最高酶活性的百分比。将该酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，由此得到的数据为酶的热稳定性数据，即下图中的曲线②。据此作出的判断，不正确的是
A. 曲线①可知80℃是该酶活性最高的温度
B. 该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降
C. 该酶使用的最佳温度范围是60～70℃
D. 曲线②的各数据点是在对应温度下测得的
25. 从某高等动物浆细胞(L)中提取全部的mRNA，并以此为模板合成相应的DNA单链(L-cDNA)，提取来自同一个体的胰岛B细胞(P)的全部mRNA(P-mRNA)。下列叙述错误的是
A. P-mRNA与L-cDNA进行分子杂交，不能全部发生碱基互补配对
B. 限制酶能特异性识别DNA分子的某种特定核苷酸序列，破坏磷酸二酯键
C. 能与L-cDNA互补的P-mRNA中含有编码呼吸酶的mRNA
D. 浆细胞不能分泌胰岛素是因为缺乏编码胰岛素的相关基因
26．下列关于细胞工程的叙述，错误的是( )
A．细胞工程不能够按照人的意愿，改变细胞内的遗传物质
B．细胞工程应用的是细胞生物学和分子生物学的原理和方法
C．将叶肉细胞的叶绿体移入奶牛体细胞属于细胞工程
D．根据操作对象不同，细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程
27．驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的柠檬型香气，从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是
A．驱蚊草的培育属于细胞工程育种，优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍
B．驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法
C．驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，但有细胞脱分化和再分化的过程
D．驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术，育种原理是基因重组
28．如图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程，据图分析错误的是
A．①过程需用纤维素酶和果胶酶的混合物处理
B．③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能
C．②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变
D．④过程需用适宜配比的生长素和细胞分裂素处理
29．下图表示用草木樨状黄芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗盐新品种过程，有关叙述正确的是
A．①过程需在低渗溶液中用相应的酶处理
B．原生质体A和原生质体B的细胞器种类相同
C．过程③完成的标志是两个细胞核完全融合
D．经过④过程所得的愈伤组织细胞含有四个染色体组
30．实验人员利用矮牵牛（二倍体，2n=14）的红色花瓣细胞与枸杞（异源四倍体，4n=48）叶肉细胞，制备相应的原生质体并诱导其融合，经筛选、培养获得杂种植株。下列叙述不正确的是（ ）
A．可用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁制备原生质体
B．可以采用物理方法（电激、离心、振动等）和化学方法（聚乙二醇）诱导原生质体进行融合
C．可利用显微镜观察，筛选出杂种原生质体
D．若原生质体两两融合，融合细胞染色体均为62条
二．非选择题（31-33题每空1分，34题每空2分，共40分）
31. 请回答下列有关生物技术实践的问题。
（1）下列关于尿素分解菌和纤维素分解菌的分离的叙述中,错误的是_____
A.前者需要尿素作为唯一的氮源,后者需要以纤维素为唯一的碳源
B.刚果红染色法也可用于鉴定尿素分解菌
C.两个过程中都需要梯度稀释
D.尿素分解菌能产生脲酶，纤维素分解菌能产生纤维素酶
（2）为从土壤中筛选能有效降解尿素的分解菌。研究人员配制以尿素为唯一氮源的培养基,该培养基为___________(从用途角度分析)。在分离纯化、计数过程中,通常采用稀释涂布平板法接种,该计数法统计的活菌数一般比实际活菌数低，原因是______________________。 实验过程中还需设制空白培养基作为对照,其目的是____________________________。
（3）在提取胡萝卜素时，常用的萃取剂具有_____________等特点。在鉴定胡萝卜素粗品时,常用______法。分析下面的结果示意图：
a是指萃取样品中的_______________，萃取样品中是否存在β-胡萝卜素？______（有或没有）。
32．生姜在生活中用处极广，既可作为菜的配料，也可制备生姜汁，还可提取生姜油制作化妆品及香料等. 回答下列问题：
（1）为提高生姜的出汁率，常用果胶酶进行处理，该酶包括果胶分解酶和果胶酯酶、_________等。
（2）工业上大规模生产姜汁，会采用固定化酶技术，该技术的优点在于___________（答出二点）。
（3）因生姜油具备易挥发、不溶于水、化学性质稳定的特性，所以可采用_____________法提取。下表是某同学提取生姜油实验过程中得到的数据，若该实验数据准确，则其反映出操作过程中应该控制__________
实验次数、
因素
干姜（g)
水量(mb)
蒸馏时间(h)
姜油
出油(%)
色泽
第一次
25
130
2.0
0.15
0.6
淡黄色
第二次
25
140
2.0
0.17
0.68
淡黄色
第三次
25
150
2.0
0.18
0. 72
淡黄色
第四次
25
160
2.0
0.18
0. 72
淡黄色
第五次
25
150
2.5
0.21
0. 84
淡黄色
第六次
25
150
3.0
0.23
0. 92
淡黄色
33. 为使水稻获得抗除草剂性状，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株，获得抗草甘膦转基因水稻。
注：GUS基因表达产物经染色能从无色变成蓝色
（1）将________基因作为目的基因，与Ti质粒用相同的限制酶和DNA连接酶处理构建___________。
（2）用________处理农杆菌后获得感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在添加_______的培养基中，经筛选1得到含基因表达载体的农杆菌。
（3）取某品种水稻的幼胚，先进行________处理，然后接种到培养基中，水稻幼胚细胞发生脱分化形成愈伤组织。用含基因表达载体的农杆菌侵染该愈伤组织。
（4）除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外，还可以利用_______基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2，以确定目的基因是否表达。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的_____________过程，获得转基因水稻。
（5）为获得具有抗除草剂性状的转基因水稻，还需要在个体水平进行抗性测试。请你设计一个实验方案，筛选出对草甘膦具有抗性的转基因水稻。____________________________
34.PRSV是单链RNA病毒，由蚜虫传播危害木瓜，华南农业大学通过农杆菌转化法成功培育出中国首例抗PRSV转基因木瓜。通过转基因技术培育植物抗病毒品种是目前常用的方法，请回答：
(1)基因与染色体的关系是：一条染色体上有多个基因，基因在___________________。
(2)转基因技术的核心步骤是______
____，该步骤必须用到的工具酶包括_______________，基因表达载体中含有启动子和终止子，这两者是___________(填“复制”或“转录”)过程所必须的。此步骤中一般用________限制酶处理，目的是防止Ti质粒或________自身环化、防止目的基因和Ti质粒反向连接。
(3)农杆菌转化法的原理是当植物体受到损伤时，伤口处的细胞会分泌大量的________化合物，吸引农杆菌移向这些细胞；如果将目的基因插人到Ti质粒的_________上，通过农杆菌的______作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插人到植物细胞的___________上。
参考答案
一．选择题
1—5.CDBCB 6—10 DBADD 11—15 BDDBB 16—20 ACACB 21—25 CCCDD 26—30 ADCDD
二．非选择题
31.【答案】（1）B（2）选择培养基 当两个或多个细胞连接在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
验证培养基灭菌是否彻底 （3）沸点高且不与水混溶 纸层析 （4）其他色素或杂质 没有
32.【答案】（1） 多聚半乳糖醛酸酶 （2） 易与产物分离;可反复使用;可连续化生产;稳定性好等 （3） 水蒸气蒸馏 适宜的水量适宜的蒸馏时间
33【答案】(1)草甘膦抗性 基因表达载体 (2)CaCl2 潮霉素 (3)消毒 (4)GUS 再分化 (5)选取长势相同的野生型和转基因水稻，用等量相同浓度的草甘膦农药喷洒，相同环境条件下培养一段时间后，观测水稻的生长情况
34.【答案】（1）染色体上呈线性排列 （2）基因表达载体的构建 限制酶和DNA连接酶 转录 两种 目的基因 （3）酚类 T-DNA 转化 染色体DNA
答案详解：
1.【答案】C
2.【答案】D
【解析】果醋制作利用的醋酸菌是一种好氧菌，而且为原核生物，能进行有氧呼吸，A正确；当糖源不足时，醋酸菌先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，B正确；当氧气和糖源都充足时，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸，C正确；实验表明，醋酸菌对氧气的含量很敏感，即使短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡，D错误。
3.【答案】B
【解析】土壤中各种微生物数量不同，细菌大约为70%～90%，其次是放线菌，真菌最少，故不同类型微生物，要按不同稀释倍数进行，A正确；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30-300之间的平板进行计数，B错误；根据选项A可知，测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，需要选用的稀释范围不同，C正确；；验证选择培养基是否具有选择作用，需设立牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，若后者上的菌落数明显大于前者，说明前者具有筛选作用，D正确。
4.【答案】C
【解析】植物组织培养的流程是制备MS固体培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培所以C错误。
5.【答案】B
【解析】①过程表示将目的基因（SOD基因）导入植物细胞的过程，常用农杆菌转化法，A错误；②、③分别表示脱分化、再分化过程，需要在严格无菌操作就可以完成，B正确；SOD催化O2形成H2O2的机制是降低化学反应的活化能，不能为该反应提供能量，C错误；据图分析可知，该育种方式利用了细胞工程和基因工程，通过离体细胞发育成完整的植株的过程体现了植物细胞具有全能性，D错误。
6.【答案】D
【解析】蒸馏法是利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来，适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油；压榨法是通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油，适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的提取；萃取法是使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发掉溶剂后就可获得芳香油，适用范围较广，要求原料的颗粒尽量小，能充分浸泡在有机溶剂里。
7.【答案】B
【解析】A.新鲜胡萝卜含大量水分，提取时应干燥，但要控制干燥时间和温度，若温度太高、干燥时间太长会导致胡萝卜素分解，A错误；
B.图中甲是萃取，所用萃取剂应具有较高的溶点，并能充分溶解胡萝卜素，B正确；
C.图中乙过程表示浓缩，在此之前进行过滤的目的是除去萃取液中的不溶物，C错误；
D.胡萝卜素的提取方法有三种：一是从植物中提取，二是从岩藻中获得，三是利用微生物发酵生产，D错误。
8.【答案】A
【解析】实验目的是探究6种有机溶剂对枸杞中类胡萝卜素提取量的影响，自变量为有机溶剂种类的不同，实验步骤为无关变量，B项、C项正确，A项错误；类胡萝卜素易溶于有机溶剂，可以用有机溶剂提取类胡萝卜素，D项正确。
9.【答案】D
【解析】采用压榨法从橘皮中提取橘皮精油时，由于橘皮中含有果胶和果蜡，直接压榨容易滑脱，出油率较低，为了提高出油率，常用石灰水浸泡，石灰水呈弱碱性，能够破坏细胞结构，分解果胶，A正确；为了使橘皮油与水容易分离，需分别加入相当于橘皮质量0.25%的碳酸氢钠和5%的硫酸钠，并调节pH至7～8，B正确；过程④的目的是除去压榨液中的固体物和残渣，过程⑥的目的是除去少量水分和蜡质等杂质，C正确；④过滤之后，需要离心，进一步除去质量较小的残留固体物，再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮油分离出来，此时橘皮油还含有少量的水和果蜡，需在5～10℃下静置5～7天，D正确；
10.【答案】D
【解析】玫瑰精油可以用蒸馏和萃取的方法提取，橘皮精油可以用压榨的方法提取，A项错误；在玫瑰精油乳浊液中加入NaCl可以使油水分离，B项错误；在适宜温度下延长蒸馏时间有利于充分提取玫瑰精油，C项正确；花开盛期的玫瑰花含油量最高，最适用于提取精油，D项正确。
11.【答案】B
【解析】提取组织mRNA进行逆转录后得到的cDNA可以作为PCR的模板，PCR技术体外扩增获得大量目的基因，A正确；用E蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交，检测到玉米细胞中具有E蛋白基因，但E蛋白基因不一定能成功表达，因此培育出的玉米不一定具有抗旱能力，B错误；用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞进行植物组织培养时，需要严格无菌操作，保证无菌环境，C正确；用CaCl2处理农杆菌，使其处于易于吸收周围环境中的DNA分子的感受态，有利于目的基因导入受体细胞，D正确。
12.【答案】D
【解析】要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂交技术，A正确；将目的基因导入到植物细胞，常用农杆菌转化法，可以将目的基因C导入到农杆菌的Ti质粒的T-DNA段，之后再用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞中染色体上的DNA上，B正确；图2中显示标记基因时潮霉素抗性基因，应该在培养基中添加潮霉素，筛选被转化的菊花细胞，C正确；据图分析可知，在目的基因的两端、启动子和终止子之间都有限制性核酸内切酶EcoRⅠ的切割位点，因此可以用限制性核酸内切酶EcoRⅠ切割目的基因和运载体，之后再用DNA连接酶连接形成基因表达载体，D错误。
13.【答案】D
【解析】④过程是植物组织培养，依据细胞的全能性原理，A正确；毒蛋白基因的获得需要限制酶B正确；①过程所依据的理论基础之一是DNA分子结构的相似性，C正确；该基因工程的目的就是让毒蛋白基因在宿主细胞中稳定存在并高效的表达所需的遗传特性，D错误。
14.【答案】B
【解析】A、DNA连接酶可以将具有相同粘性末端的DNA片段连接起来，而产生相同的粘性末端可以是同一种限制性核酸内切酶也可以是两种限制性核酸内切酶，A项错误；B、目的基因导入受体细胞后，受体细胞内的任何基因都未发生基因突变，新的变异来源是基因重组，B项正确；C、目的基因和质粒结合的过程发生在细胞内，C项错误；D、常用的载体有大肠杆菌的质粒、噬菌体，动植物病毒等，D项错误。
15.【答案】B
【解析】sokmRNA能与hokmRNA结合，说明这两种mRNA的碱基序列互补而不是相同，A错误；当sokmRNA存在时，hok基因仍能转录，只是转录形成的hokmRNA会与sokmRNA结合，B正确；根据题干信息“转录产生的sokmRNA能与hokmRNA结合”可知，当sokmRNA存在时，与hokmRNA结合的产物能被酶讲解，从而阻止细胞死亡，C错误；由题文信息“两种mRNA结合形成的产物能被酶降解”可知，两种mRNA结合形成的产物不能够表达，D错误。
16.【答案】A
【解析】本题考查蛋白质工程与基因工程的区别与联系，要求考生理解蛋白质过程的概念和特征，理解蛋白质工程的基础是基因工程，蛋白质工程又被称为是第二代基因工程，蛋白质工程可制造一种新的蛋白质。基因工程合成自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程可制造一种新的蛋白质，A正确；基因工程和蛋白质工程都是在分子水平上进行的操作，B错误；基因工程和蛋白质工程都需对基因进行操作，C错误；蛋白质工程的基础是基因工程，蛋白质工程又被称为是第二代基因工程，D错误。
17.【答案】C
【解析】A. A→B过程是多聚酶链式反应扩增DNA片段的过程，需要加入两种引物和4种脱氧核苷酸，A正确；B. B→C为转基因绵羊的培育过程，常选用的受体细胞是受精卵，B正确；
C. A→B过程是多聚酶链式反应扩增DNA片段的过程，利用了DNA复制原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶，C正确；D. B→D为转基因植物的培育过程，其中④过程常用的方法是农杆菌转化法，D正确。
18.【答案】A
【解析】基因工程培育的抗虫植物只含有抗虫特性，不能抗病毒，A选项正确；用转基因动物作为器官移植的供体时，导入的调节因子也属于目的基因，可以抑制抗原合成，B选项错误；基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物，C选项错误；目前基因治疗还处于初期的临床试验阶段，D选项错误。
19.【答案】C
【解析】第三步将目的基因导入受体细胞没用到碱基互补配对原则，A错误；目的基因在抗虫棉中与棉花的核DNA分子结合起来才遵循基因的分离定律，B错误；图中Ⅰ为质粒，从大肠杆菌中获取后需要经过加工才能作为运载体使用，C正确；剔除培育成功的抗虫棉体内的四环素抗性基因不会影响抗虫基因的表达，但会影响目的基因的检测，D错误．
20.【答案】B
【解析】基因表达载体的组成包括启动子、目的基因、标记基因和终止子，因此用β-珠蛋白编码序列加启动子、抗四环素基因等元件来构建基因表达载体，A正确；小鼠的成熟红细胞中提取不到mRNA，B错误；导入大肠杆菌的可能是普通质粒或重组质粒，用含有四环素的培养基筛选出的大肠杆菌，不一定含有β-珠蛋白基因，则不能生产β-珠蛋白，C正确；标记基因是四环素抗性基因，因此受体细胞不能具有四环素抗性，即用Ca2+处理大肠杆菌后，将表达载体导入不具有四环素抗性的大肠杆菌中，D正确。
21.【答案】C
【解析】克螟稻和普通水稻仍然属于同一个物种，并不是新物种，A错误；获取Cry1Ab基因需使用限制酶，但不需要DNA连接酶，B错误；克螟稻能抗螟虫，说明Cry1Ab基因已整合到克螟稻细胞的染色体上并成功表达，C正确；基因突变是不定向的，因此害虫也会出现抗药性，D错误。
22.【答案】C
【解析】①过程表示去壁、诱导原生质体融合、再生出新的细胞壁，是植物体细胞杂交的第一个步骤；②③过程是植物组织培养，其中②是脱分化、③是再分化；过程⑤是将目的基因导入受体细胞，该过程常用的载体是质粒；图中育种方式是基因工程育种和植物细胞工程育种，这两种方法的突出优点都是克服了远缘杂交不亲和的障碍，综上分析，C符合题意，ABD不符合题意。
23.【答案】C
【解析】A、愈伤组织是一团排列疏松而无规则、高度液泡化的、呈无定形状态的、具有分生能力的薄壁细胞,不具有特定的结构和功能，A选项正确；B、培养应保持无菌条件，B选项正确；
C、花粉是植物的配子，属于单倍体细胞，组织培养可得到单倍体植株，是单倍体育种的第一步C选项错误；D、不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素比例不同，诱导培养物的分裂和分货，D选项正确。
24.【答案】D
【解析】由曲线①可知，该酶的最适温度是80℃，A正确；曲线②显示，酶的热稳定性从30℃开始不断下降，在70℃后，急剧下降，B正确；曲线②显示，酶的热稳定性从30℃开始不断下降，在70℃后，急剧下降，该酶使用的最佳温度范围是：60℃～70℃，C正确；曲线②中的数据是将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其残余酶活性，对于B选项而言是将该酶在35℃保存，然后在80℃下测定该酶活性，D错误。
25.【答案】D
【解析】A、根据试题分析，由于基因选择表达不同，胰岛B细胞中提取的P-mRNA与L-cDNA不能全部发生互补，A正确；B、限制酶能特异性识别DNA分子的某种特定核苷酸序列，破坏磷酸二酯键，B正确；C、浆细胞和胰岛B细胞中合成呼吸酶的基因都表达，故能与L-cDNA互补的P-mRNA中含有编码呼吸酶的mRNA，C正确；D、浆细胞不能合成胰岛素，是因为胰岛素合成相关的基因在浆细胞中不表达，D错误。
26.【答案】A
【解析】细胞工程可以通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内遗传物质或获得细胞产品，故A错误；由细胞工程概念可知，细胞工程应用的是细胞生物学和分子生物学的原理和方法，故B正确；将叶肉细胞的叶绿体移入奶牛体细胞属于细胞器水平的操作，属于细胞工程，故C正确；根据操作对象不同，细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域，故D正确。
27.【答案】D
【解析】A、驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的，采用了植物体细胞杂交技术，属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，A正确；
B、要获得天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体，需要采用酶解法(纤维素酶、果胶酶)，诱导天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体的融合可采用化学法（PEG等试剂）或物理法(电刺激等)，B正确；
C、驱蚊草培育过程不同于植物组织培养，但需要采用植物组织培养技术，因此有愈伤组织和试管苗形成，C正确；D、驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术，育种原理是染色体数目变异，D错误。
28.【答案】C
【解析】①表示去壁过程，需在适宜条件下用纤维素酶和果胶酶的混合物处理，A正确；③是脱分化过程，该过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能，B正确；②表示人工诱变过程，其原理是基因突变，而基因突变是不定向的，C错误；④表示再分化过程，决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素的共同作用在组织培养过程中非常重要，D正确。
29.【答案】D
【解析】①过程需在等渗溶液中用相应的酶处理，避免细胞吸水涨破，A项错误；草木樨状黄芪叶肉细胞含有叶绿体，木本霸王胚轴细胞没有叶绿体，B项错误；过程③完成的标志是再生出新的细胞壁，C项错误；草木樨状黄芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）均为二倍体，经过④过程所得的愈伤组织细胞含有四个染色体组，D项正确。
30.【答案】D
【解析】A、制备原生质体时需用去除细胞壁，所用酶为纤维素酶和果胶酶，A正确；
B、诱导植物原生质体融合时，可以采用物理方法（电激、离心、振动等）和化学方法（聚乙二醇）B正确；C、杂种原生质体的染色体数目是两种细胞染色体数目之和，可通过显微镜观察到染色体数目的变化，故可利用显微镜筛选得到融合后的杂种原生质体，C错误；D、若原生质体均为两两融合，则会形成3种细胞，即矮牵牛细胞自身融合的细胞、枸杞细胞自身融合的细胞，杂种细胞，所以融合后的细胞中染色体数目为28条或96条或62条，D错误。
31.【答案】（1）B（2）选择培养基 当两个或多个细胞连接在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
验证培养基灭菌是否彻底 （3）沸点高且不与水混溶 纸层析 （4）其他色素或杂质 没有
32.【答案】多聚半乳糖醛酸酶 易与产物分离;可反复使用;可连续化生产;稳定性好等 水蒸气蒸馏 适宜的水量适宜的蒸馏时间
【解析】（1）根据生姜的原料特点，生姜中含姜汁量较高，制备生姜汁最常用的是压榨法。为提高生姜的出汁率，常用果胶酶进行处理，该酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。
（2）工业上大规模生产姜汁，会采用固定化酶技术，该技术的优点在于酶与产物分离，得到的产物纯度高；酶可以反复利用，降低生成成本；这种生产技术稳定性好，可连续生产。固定化果胶酶一般不用包埋法,是因为果胶酶分子很小，容易从包埋材料中漏出，包埋法适于体积比较大的细胞。
（3）提取生姜油可采用水蒸气蒸馏法，因其具有易挥发、不溶于水、化学性质稳定的特性。根据表中同学提取生姜油实验过程中得到的数据，分析可知在水量150mL，蒸馏3h的条件下出油率最高，故操作过程中应该控制适宜的水量适宜的蒸馏时间。
33【答案】 (1)草甘膦抗性 基因表达载体 (2)CaCl2 潮霉素 (3)消毒 (4)GUS 再分化 (5)选取长势相同的野生型和转基因水稻，用等量相同浓度的草甘膦农药喷洒，相同环境条件下培养一段时间后，观测水稻的生长情况
【解析】（1）表达载体的构建是用相同的限制性内切酶切割目的基因和质粒后露出相同的黏性末端再用DNA连接酶连接，从而构建基因表达载体，题中以甘膦抗性基因作为目的基因。
（2）依据图中信息，农杆菌用CaCl2处理后变成感受态细胞，将其与基因表达载体混合完成转化后，在含有标记基因表达的潮霉素培养基中筛选，从而获得含基因表达载体的农杆菌。
（3）取某品种水稻的幼胚，进行植物组织培养时，要注意无菌操作，先将外植体进行消毒，然后接种到培养基中培养，幼胚发生脱分化形成一团未分化的薄壁细胞即愈伤组织。
（4）目的基因的检测还可以通过目的基因是否表达进行鉴定。愈伤组织经过再分化形成胚状体，进而获得完整的植株。
（5）要想从个体水平研究转基因水稻是否具有抗除草剂性状，具体操作如下：首先选取长势相同的野生型和转基因水稻，然后用等量的相同浓度的草甘膦农药喷洒，并在相同环境条件下培养一段时间后，通过水稻的生长情况即可验证。
34.【答案】（1）染色体上呈线性排列 （2）基因表达载体的构建 限制酶和DNA连接酶 转录 两种 目的基因 （3）酚类 T-DNA 转化 染色体DNA
