2017年生物一模汇编：生物工程（教师版）

2017年生物一模汇编：生物工程（教师版）

专题七 生物工程 ‎【2017年崇明一模】‎ ‎1．回答下列有关微生物的问题。（10分）‎ A Xμg/mLμg/mL Yμg/mLμg/mL B X μg/mL Y μg/mL 图1‎ 抑菌圈 防御素是近年来被广泛关注的抗菌多肽，为了对“重组人β防御素-3”（rhβD-3）的抗菌性进行研究，在分别培养了大肠杆菌和金黄葡萄球菌的培养皿中均放入浸泡过X和Y两种rhβD-3溶液浓度的圆形滤纸，实验结果：“X”纸片周围形成抑菌圈，“Y”纸片周围无抑菌圈（图1）。‎ ‎25．根据前期测定到的不同浓度rhβD-3对大肠杆菌和金黄葡萄球菌的抗菌效果曲线图2，可推断出A培养皿中的是 菌。‎ ‎26．据图2分析，浓度Y的值大约在 μg/mL范围内。‎ ‎27．根据图3对rhβD-3在不同温度下保存的稳定性检测结果，下列说法合理的是 （多选）。‎ A．随着存放时间的增加，抗菌活性均有不同程度的下降 B．将rhβD-3于℃低温贮存4周，其抗菌活性变化不大 C．高温不利于维持rhβD-3多肽的空间结构 D．温度越高，rhβD-3的抗菌活性就越差 传统的抗菌素主要作用于病原微生物的酶；而防御素主要作用于病原微生物的细胞膜，使病原微生物不易产生耐药性。‎ ‎28．靶细胞（病原微生物）易对传统的抗菌素产生耐药性的根本原因是 。‎ ‎29．青霉素的抑菌原理和防御素的抗菌原理的差异体现在 。‎ ‎【解析】解：25．根据图2中曲线可以知道，低浓度的rhβD-3就对金黄色葡萄球菌产生抑菌效果，并且抑菌效果比对大肠杆菌的好，由此可以推断A培养皿中的是金黄葡萄球菌．  26．图1中Y浓度对两种细菌均没有抑菌效果，因此结合图2分析，浓度Y的值大约在5-10ug/ml范围内．  27．A．分析曲线可以知道，随着存放时间的增加，抗菌活性均有不同程度的下降，A正确；  B．-70℃低温条件下，抑菌圈直径变化不大，因此将于rhβD-3于-70℃低温贮存4周，其抗菌活性变化不大，B正确；  C．曲线中可以看出，高温不利于rhβD-3维持多肽的空间结构，C正确；  D．因为没有进行更高温度的对比实验，因此不能获得该结论，D错误．  28．根据题意可以知道，传统的抗菌素主要作用于病原微生物的酶，因此靶细胞(病原微生物)易对传统的抗菌素产生耐药性的根本原因是控制酶合成的基因发生突变．  29．防御素主要作用于病原微生物的细胞膜，使病原微生物不易产生耐药性，遗传你青霉素的抑菌原理和防御素的抗菌原理的差异体现在青霉素抑制细菌细胞壁合成，而防御素作用于细胞膜． ‎ ‎【答案】‎ 25． 金黄葡萄球菌 ‎ ‎26． 5-10 27． ABC ‎28． 控制酶合成的基因发生突变 ‎29． 青霉素抑制细菌细胞壁合成，而防御素作用于细胞膜 ‎【2017年崇明一模】‎ ‎2．回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。（10分）‎ 为制备目的基因Y（图19）与质粒X（图20）的重组DNA，将质粒X与含Y的DNA片段加入含有限制性核酸内切酶BgIⅡ与BamHⅠ的反应混合物中，酶切后的片段再加入含有连接酶的反应体系中。其中，质粒X含有leu2基因，可用于合成亮氨酸，目的基因Y含有卡那霉素抗性基因KanR。‎ BamH I BamH I 目的基因Y ‎（500bp）‎ ‎（包含KanR）‎ 图19‎ 质粒X ‎（2800bp）‎ Bgl II leu 2‎ 图20‎ BgI II和BamH I的识别序列及酶切位点 图21‎ BgI II ‎－AGATCT－‎ ‎－TCTAGA－‎ BamH I ‎－GGATCC－‎ ‎－CCTAGG－‎ ‎43．根据图21分别写出BgI Ⅱ与BamHⅠ酶切后形成的末端序列： 、 。‎ ‎44．BgI II酶切后的质粒与BamHⅠ酶切后的目的基因Y能够连接的原因是 。‎ 将连接后的产物转化入一种Z细菌，Z细菌对卡那霉素敏感，且不能在缺乏亮氨酸的培养基中培养。‎ ‎45．使用BgI II处理重组质粒，可以得到 。‎ A．长度为3300bp的环状DNA B．长度为3300bp的线形DNA C．长度为2800bp和500bp的线形DNA D．长度为2800bp的环状DNA ‎46．要筛选含有重组质粒的Z细胞，应选择 。‎ A．卡那霉素和亮氨酸均含的培养基 B．卡那霉素和亮氨酸均不含的培养基 C．含卡那霉素但不含亮氨酸的培养基 D．含亮氨酸但不含卡那霉素的培养基 ‎【解析】解：基因工程技术的基本步骤：  43．目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。  44．基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．  45．将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．  46．目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．‎ ‎—A 或 GATCT— ‎ ‎—TCTAG A—‎ ‎—G 或 GATCC— ‎ ‎—CCTAG G—‎ ‎【答案】‎ ‎43．（2分） ‎ ‎44． 酶切后产生相同的黏性末端，并遵循碱基互补配对原则 ‎45． A 46． C ‎【2017年虹口一模】‎ ‎3．回答有关微生物的问题（9分）‎ 分析表1的培养基配方，回答有关问题。 表1 ‎ 成分 葡萄糖 KH2PO4‎ FeSO4‎ NaCl MgSO4•7H2O 琼脂 蒸馏水 含量 ‎30g ‎1g ‎0.01g ‎3g ‎0.5g ‎15g ‎1L ‎26．根据物理性质，该培养基属于_________培养基；根据用途划分，则属于_______培养基；根据培养基成分，所培养微生物的同化作用的类型是_________。‎ ‎27．不论何种培养基，配制完成后都要在121℃，1．05Kg/cm2下保持15-30分钟，此操作的目的是_____。‎ ‎ 选用适合的培养基，制备成平板，分别用三个平板涂布接种三种细菌（E．coli、S．albus、B．subtilis），然后用镊子将三块沾有1万单位抗生素X、10万单位抗生素X和25万单位抗生素Y的圆纸片放在每个平板上，恒温培养。‎ ‎28．上述实验过程中需要灭菌的有_____________（多选）。‎ A．平板 B．涂布工具 C．圆纸片 D．镊子 经24小时培养后，测量圆纸片周围清晰区的宽度，数据如表2。 ‎ ‎29．在控制S．albus感染时，选用哪种抗生素及浓度较为合理？_____________。‎ ‎30．有病人感染B．subtilis而患病，选用25万单位抗生素X治疗该病人是不明智的做法，理由是_____。‎ A．缺乏25万单位抗生素X的实验数据 ‎ B．避免抗生素滥用 C．10万单位抗生素X对B．subtilis亦有作用 ‎ D．25万单位抗生素X会对人体细胞造成损害 ‎【解析】解：26．分析表格，表格中琼脂将作为培养基的凝固剂，因此根据物理性质，该培养基属于固体培养基；根据用途划分，因为培养基中缺少氮源，因此该培养基属于选择培养基；根据培养基成分，培养基中以葡萄糖为有机碳源，因此所培养微生物的同化作用的类型是异养型．  27．不论何种培养基，配制完成后都要在121℃，1．05kg/cm3下保持15-30分钟，即进行高压蒸汽灭菌，此操作的目的是杀灭芽孢．  28．根据题意可以知道，该实验的目的是检测不同浓度的抗生素X的抑菌效果，因此平板中需要有一定的微生物，不需要灭菌，而B涂布工具、C圆纸片和D镊子均需要灭菌．       29．在控制S．albus方面，1万单位和10万单位抗生素X的效用差异不大，而25万单位抑制效果较差，因此应选用1万单位抗生素X较为合理．  30．分析表格数据可以知道，若感染B．subtilis而患病，用25万单位甲抗生素治疗该病是不明智的，原因是没有证据显示25万单位甲抗生素的效用比20万单位甲抗生素；高浓度的抗生素可能有严重的副作用；滥用抗生素可能会加速大量细菌种类产生抗生素抗性，所以ABC选项是正确的．‎ ‎【答案】26．固体 选择 异养 ‎ ‎27．杀灭芽孢 28．BCD ‎ ‎29．1万单位抗生素X 30．ABC ‎【2017年嘉定一模】‎ ‎4．分析有关现代生物技术的资料，回答问题。（10分）‎ 基因工程、细胞工程和酶工程都属于现代生命科学技术。它运用生命科学理论和工程技术手段，为人类生产提供所需的物质和产品。例如：‎ ‎①从某细菌中获取抗虫基因与质粒运载体拼接成重组DNA，导入棉花的愈伤组织细胞内，经培养、筛选和培育获得抗虫棉品种。‎ ‎②取转基因高产玉米幼叶组织细胞进行组织培养，先形成愈伤组织，再逐渐诱导成试管苗，移栽并在常规条件下长成植株。‎ ‎③一定条件下，将小鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合形成既能快速繁殖又能产生单一抗体的杂交瘤细胞。‎ ‎④糖尿病患者常用尿糖试纸作为日常自我检测血糖的手段，尿糖试纸上有两种酶，与尿液相遇时会发生显色反应。‎ ‎34．①中，完成抗虫基因的剪切与拼接的酶分别是 和 。‎ ‎35．若质粒运载体被切割后，得到的分子末端序列为 ，则能与该载体连接的抗病基因分子末端是 。‎ ‎36．该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是 。‎ A．淀粉 B．脂类 C．蛋白质 D．核酸 ‎37．②中，“植物幼叶细胞→愈伤组织→完整植株”一般经过 、再分化两个阶段；而“幼叶细胞 最终能长成完整植株”的实例，说明植物细胞具有 。③中的“制备单克隆抗体”所采用的细胞 工程技术包括 。‎ ‎①细胞培养 ②细胞融合 ③转基因技术 ④细胞核移植技术 A．①② B．①③ C．②③ D．③④‎ ‎38．④中的尿糖试纸上含有过氧化氢酶和 。‎ A．淀粉酶 B．脂肪酶 C．纤维素酶 D．葡萄糖氧化酶 ‎【解析】解：基因工程技术的基本步骤：  34．目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．  35．基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．  36‎ ‎．将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．  37．目的基因的检测与鉴定：‎ 分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。‎ 个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 植物组织培养的过程：外植体 -（脱分化）-愈伤组织-（再分化）-新植体。‎ ‎【答案】34． 限制酶 DNA连接酶 ‎ ‎35． A 36． C ‎37． 去分化 全能性 A ‎ ‎38． D ‎【2017年金山一模】‎ ‎5．为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况，做如图1操作．用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中，如此重复3次，将10mL生牛奶稀释到10﹣4浓度后，取0．1mL滴在培养基上．‎ ‎（1）牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒，以杀死有害微生物．巴氏消毒的方法是　 　．‎ ‎（2）将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布，应选择如图2所示的涂布工具是　 ．该涂布工具最合适的灭菌方法是　 　．‎ A．火焰灼烧 B．高温高压灭菌 C．酒精擦拭 D．紫外线照射 ‎（3）消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死，若用稀释培养法检测消毒后牛奶是否含有细菌，则在操作步骤上应作什么改动？　 　．‎ ‎（4）从生牛奶取样培养得到的菌落中，混有各种杂菌，从中检测出大肠杆菌的方法是，在培养基中加入　 　，具有　 　特征可以鉴别大肠杆菌．‎ ‎【解析】解：（1）常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法．巴氏消毒的方法是指70﹣75℃煮30分钟或80℃煮15分钟，使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是牛奶的营养成分不被破坏．‎ ‎（2）将液体菌种接种在固体培养基上常用的方法主要是稀释涂布平板法，所用的接种工具是涂布器．即图2中的B．为防止杂菌污染，该工具应浸泡于酒精中，涂布前应将涂布器引燃（灼烧）后待冷却．‎ ‎（3）消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死，若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量，由于细菌数目减少，故应稀释次数减少．‎ ‎（4）检测大肠杆菌的方法是在培养基中加人伊红美蓝，菌落具有（金属光泽的紫）黑色特征的可以认定为大肠杆菌．‎ ‎【答案】（1）70﹣75℃煮30分钟（80℃煮15分钟） （2）B B ‎（3）稀释次数减少 （4）伊红美蓝 （金属光泽的紫）黑色 ‎【2017年金山一模】‎ ‎6．生物工程是改造生物的结构与功能的主要手段．生物工程的四个主要领域并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的．它们之间的关系示意如图1所示：‎ 图1‎ 图3‎ ‎（1）人类最早运用的生物工程技术是　 　．图中编号①指的是　 　．请列出图中编号②工程在生产生活实践中的两个应用实例　 　．‎ ‎（2）筛选抗癌药物经常要运用　 　技术．单克隆抗体的生产过程利用了生物工程中的 ‎　 　技术．‎ ‎（3）现代生物工程中的核心技术是基因工程．如在利用基因工程方法生产人生长激素中，DNA重组过程必需的酶是　 　、　 　酶．‎ ‎（4）用限制酶EcoR1、Kpn1和二者的混合物分别降解一个1000bp（1bp即1个碱基对）的DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，如图2所示凝胶电泳结果．该DNA分子的酶切图谱正确的是（如图3所示）　 　．‎ ‎【解析】解：（1）生物工程包括：细胞工程、发酵工程、酶工程、基因工程四大类生物工程，在这些生物工程中人类最早运用的生物工程技术是发酵工程；图中编号①是指微生物；②属于酶工程，在生产生活实践中的两个应用实例有：发酵工程微生物加酶洗衣粉、测试尿糖的酶试纸．‎ ‎（2）科学家常用动物细胞培养技术培养正常或病变的细胞，用于生理病理药理等方面的研究，如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据．单克隆抗体的生产过程利用了生物工程中动物细胞融合技术．‎ ‎（3）基因工程中构建基因表达载体时，首先需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次还需要DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA．‎ ‎（4）用限制性核酸内切酶EcoRⅠ切后得到的DNA分子仍是1000bp，由此可推知该DNA分子为环状DNA，且只有1个EcoRⅠ的切割位点；用KpnⅠ单独酶切会得到600bp和400bp两种长度的DNA分子，可知该DNA分子中含有2个KpnⅠ的切割位点；用EcoRI，Kpnl同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子，则EcoRI的酶切位点位于长度为400bp的DNA片段上．故选：D．‎ ‎【答案】‎ ‎（1）发酵工程 微生物 发酵工程微生物加酶洗衣粉、测试尿糖的酶试纸 （2） 动物细胞培养 动物细胞融合 ‎ ‎（3）限制酶 DNA连接 （4）D ‎【2017年静安一模】‎ ‎7．微生物与基因工程：‎ 以下是以大肠杆菌为材料的实验．下表是大肠杆菌培养基的配方．‎ 成分 蛋白胨 牛肉膏 NaCl 蒸馏水 pH 含量 ‎10g ‎5g ‎10g ‎1000ml ‎7．0‎ ‎（1）表中各项成分中，能承担生长因子作用的是　 　能提供氮源的是　 　。‎ 利用转基因技术可以生产出更多廉价的胰岛素．如图为转基因实验过程示意图，其中中数字表示相应过程．‎ 天然大肠杆菌质粒一般含有lacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因；人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外，还含有含氨苄青霉素抗性基因．‎ 若lacZ基因完整，便可表达出β﹣半乳糖苷酶，β﹣半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X﹣gal水解成蓝色，形成蓝色菌落圈；若lacZ基因中插入了外源基因，带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达β﹣半乳糖苷酶，将形成白色菌落．此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功．‎ ‎（2）目的基因是　 　。‎ ‎（3）过程①②一般需要能产生　 　的限制性内切酶；过程③④需要　 　酶。‎ ‎（4）用于目的基因受体的大肠杆菌质粒应选择不含氨苄青霉素抗性基因，原因是 　 　 。‎ ‎（5）图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外，还应加入　 　等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌．‎ ‎（6）将上述处理后的大肠杆菌置于图中培养皿内培养，为了保证获得单个菌落，常用的接种方法是　 　。‎ ‎（7）以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒．培养一段时间后出现三种类型：菌落处有蓝色、菌落处有白色、菌落不能生长．‎ 成功导入重组质粒的菌落圈的表现是　 　。‎ 那些在培养基中不能生长的原因是　 　。‎ ‎【解析】解：（1）表中各项成分中，能承担生长因子作用的是牛肉膏，能提供氮源的是蛋白胨（牛肉膏）．‎ ‎（2）由图可知，目的基因是胰岛素基因． ‎ ‎（3）过程①②一般需要用同种限制酶切割，以产生相同的粘性末端；过程③④需要DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组质粒．‎ ‎（4）氨苄青霉素抗性基因为标记基因，因此用于目的基因受体的大肠杆菌质粒应选择不含氨苄青霉素抗性基因，以便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌．‎ ‎（5）本题是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒，结合题干信息“若lacZ基因完整，便可表达出β﹣半乳糖苷酶，并能将培养基中含有的IPTG和X﹣gal水解成蓝色，形成蓝色菌落；若lacZ基因中插入了外源基因，带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达β﹣半乳糖苷酶，将形成白色菌落；pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因．”可知，图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入IPTG、X﹣gal、氨苄青霉素等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌．‎ ‎（6）接种微生物常用划线接种法和稀释涂布法．‎ ‎（7）如果长出蓝色菌落，说明自连的运载体PUC118质粒已转入受体菌，但重组质粒没导入受体大肠杆菌；如果长出白色菌落，说明重组质粒已导入受体大肠杆菌．那些在培养基中不能生长的原因是未导入任何人工合成质粒的大肠杆菌或大肠杆菌中无人工合成的质粒．‎ ‎【答案】（1）牛肉膏 蛋白胨（牛肉膏） （2）胰岛素基因 ‎ （2） 相同粘性末端 DNA连接酶 ‎ ‎（4）以便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌 ‎（5）IPTG、X﹣gal、氨苄青霉素 ‎（6）划线接种法和稀释涂布 ‎（7）长出白色菌落 未导入任何人工合成质粒的大肠杆菌或大肠杆菌中无人工合成的质粒 ‎【2017年闵行一模】‎ ‎8．回答下列与微生物培养有关的问题。（6分）‎ ‎26．某细菌固体培养基的组成成分如下表。该培养基能提供无机盐的是 ________（填编号），能提供生长因子的是________（填编号）。‎ 图4‎ ‎27．为了检测大肠杆菌对抗生素的敏感性，在37℃培养 箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。将分别含有 三种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培 养一段时间后，结果如图 4。根据上述实验结果，为达 到抗菌目的，最好选择的抗生素是________。 治疗肺 结核的常用抗生素是利福平，其抑菌的机理是 。‎ ‎28．19世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击，在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。根据你所掌握的知识分析导致生产失败的根源是 。 ‎ ‎29．某学生为了验证科赫法则的正确性，从患猪流感的动物中提取了病原体，然后接种到通用培养基上进行培养，但是得不到病原体，原因是 。‎ A．科赫法则是错误的 B．培养基缺乏病原体生存的环境 C．没有无菌操作 D．接种时划线法错误 ‎【解析】解：26．分析表格中该细菌固体培养基的组成成分，该培养基能提供无机盐的是①②③⑤，牛肉膏和维生素能为微生物的生长提供生长因子．  27．含有青霉素的菌落产生的抑菌圈最大，所以最好选择的抗生素是青霉素． 治疗肺结核的常用抗生素是利福平，其抑菌的机理是利福平可以抑制结核杆菌RNA的合成（或抑制转录）．  28．葡萄酒变酸、变味是因为发酵物中混入了杂菌，如乳酸菌．  29．根据题意可以知道，该实验培养的是患猪流感的动物中提取了病原体，而该病原体属于病毒，病毒只能寄生在活细胞中才能代谢和繁殖，因此培养基缺乏病原体生存的环境将得不到病原体，B正确． ‎ ‎【答案】26．①②③⑤；①④‎ ‎27．青霉素；利福平可以抑制结核杆菌RNA的合成（或抑制转录）‎ ‎28．发酵物中混入了杂菌 29．B ‎【2017年闵行一模】‎ ‎9．回答下列有关生物工程的问题（9分）‎ 实验结果 处理 生长素浓度(ng/g)‎ 弯曲角度a 向光侧 背光侧 强光 ‎184．6‎ ‎498．2‎ ‎35．5°‎ 弱光 ‎210．5‎ ‎421．6‎ ‎17．50‎ 黑暗 ‎418．2‎ ‎418．9‎ ‎0°‎ 图13示利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素，也称为1型糖尿病）的过程设计图解。‎ 图13‎ ‎49． 图13中①所示的结构是________，④过程常用的是________方法。‎ ‎50． 图13中需要的目的基因是________，⑥过程需要________酶。目的基因体外扩增的技术简称为________。‎ ‎51． 图13所示治病的方法叫做________，与一般的异体移植相比最大的优点是_______。‎ ‎52． 1型糖尿病患者的另一种治疗方法是可以通过注射胰岛素的方法来缓解病情。利用微生物基因工程技术发酵生产可以获得大量胰岛素。现有一种可以作为目的基因运载体的普通质粒，用不同的酶切割质粒如图14所示 [ 1kb即1000个碱基对，*表示EcoRV限制酶切割的一个黏性末端（单链片段）]。请将Mbol酶和EcoRV酶在图15中标注其所在位置和切割的长度。‎ 图14‎ 图15‎ ‎【解析】解： 49．①与去核卵细胞组成的重组细胞可以发育成囊胚，则①为细胞核；④过程将目的基因导入②中得到重组细胞，将目的基因导入动物细胞最有效的常用方法是显微注射技术。‎ ‎50．该设计是为了治疗基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素，因此需要的目的基因是控制合成胰岛素的正常胰岛素基因；mRNA得到DNA是逆转录的过程，目的基因体外扩增采用PCR技术。‎ ‎51． 基因治疗是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗目的的治疗方法。由图可知，该治疗方法将健康的胰岛B细胞基因导入重组细胞中，诱导分化获取正常合成胰岛素的胰岛B细胞，从而用于治疗糖尿病患者，故属于体外基因治疗；治疗过程使用患者本身的细胞核进行基因重组、胚胎培养与细胞培养等过程，故与一般异体移植相比，该方法具有没有排斥反应的优点。‎ ‎52．分析质粒被内切酶切割后产生的片段，可知EcoRV有两个酶切位点，MboI有两个酶切位点，并且这四个酶切位点不同。则质粒上EcoRV、MboI的切割位点如下图：‎ ‎【答案】‎ ‎49． 细胞核；显微注射 ‎50． （正常的）胰岛素基因；逆转录；PCR（聚合酶链反应）‎ ‎51． 基因治疗；没有（免疫）排异反应 ‎52． 如下图所示：‎ ‎【2017年杨浦一模】‎ ‎10．回答下列有关微生物和免疫调节的问题。（10分）‎ 实验一：用不带特殊病原体的小鼠进行如下特异性免疫实验，过程如图一。注射T细胞或血清（↓）后的结果如图二。‎ ‎33．图一实验中，B组小鼠的作用是___________。‎ ‎34．从图二可知，Ⅱ组与Ⅳ组相比，小鼠脾脏中的活细菌数量的增长趋势相同，说明血清中的___________不能有效抑制脾脏内的细菌繁殖。注射来自于A组小鼠的T细胞后，在4‎ 天内Ⅰ组小鼠脾脏中的活细菌数量无明显变化，说明该组T细胞（致敏T细胞）__________（促进/抑制） 细菌数量的增长，这类特异性免疫属于_______免疫。‎ 实验二：细菌X可在培养基上生长，将其接种到培养基上，加盖后，以①～⑥不同的方式处理，并放置在不同的温度环境中，培养24小时后，观察所得结果，列表如下： ‎ 根据实验二，回答下列问题：‎ ‎35．下列对结果所作出的判断中，错误的是（ ）。（多选）‎ A．比较①和⑥可知，有细菌则培养基的表面会变浑浊 B．若揭开⑥的盖子，24小时后可观察到培养基表面会出现浑浊 C．将编号⑤和⑥的结果比较可知，0℃的环境不适合细菌生长 D．根据编号②和③的观察结果，可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强 36． 实验二可得出结论： ___________________________________________________、‎ ‎_______________________________________________________ 。‎ ‎【解析】解：33．在设计实验中，除了实验组，还需设置对照组与其作为对照。B组注射的是生理盐水，因此是作为对照组被设置的。‎ ‎34．人体免疫系统通过体液免疫产生抗体，分泌到血清中运输到全身，注射血清后活菌数依然增长，说明血清中的抗体不能有效抑制脾脏内的细菌繁殖。注射来自于A组小鼠的T细胞后，在4天内组小鼠脾脏中的活细菌数量无明显变化，说明细菌的增长受到了抑制。而这种通过T细胞进行的免疫为细胞免疫。‎ ‎35．C项，⑤和⑥有两个变量：有无接种细菌和温度，不能相互比较。实验中，应控制相互比较的两个实验组变量唯一，故C项叙述错误。‎ D项，②吸有抗生素X的圆片周围呈清晰区，其余表面浑浊证明抗生素X抑制了周围细菌的生长；③全表 面浑浊，细菌生长并没有受到抗生素Y的影响，综上可知， 抗生素X比抗生素Y的杀菌能力强，故D项 叙述错误。‎ A项，①为有细菌生长的培养基，⑥为无细菌生长的空白培养基，对比二者可发现，有细菌的培养基的表面会变浑浊，故A项叙述正确。‎ B项，培养基加盖是为了防止外界杂菌污染，揭盖之后外界杂菌进入培养基并在其表面生长，使表面看起来变得浑浊，故B项叙述正确。‎ 36. 对比①和⑤，发现①中细菌生长旺盛，⑤中细菌生长受到抑制，可知低温（0℃）抑制细菌（X）的繁殖。对比②③④，发现醋对细菌生长抑制效果最大，抗生素Y几乎对细菌生长没有影响，可知醋、抗生素X、抗生素Y对细菌X的抑制作用效果依次减小。‎ ‎【答案】33．对照 34．抗体 抑制 细胞 35．CD ‎ ‎36．低温（0℃）抑制细菌（X）的繁殖 醋、抗生素X、抗生素Y对细菌X的抑制作用效果依次减小 ‎【2017年杨浦一模】‎ ‎11．回答下列有关微生物的问题（10分）。‎ 图1是从土壤中筛选产脲酶（该酶能特异性地催化尿素水解释放出氨和二氧化碳）细菌的过程，图2是脲酶基因转录的mRNA部分序列。‎ 图2‎ 图1‎ ‎25．图中选择培养基应以 为唯一氮源，对该培养基进行灭菌的条件是 ，目的是 。‎ ‎26．对细菌培养液进行逐级稀释的目的是 ，该过程采取的接种方法是 。‎ ‎27．细菌的基因分布于 。现有一菌株的脲酶由于基因突变而失活，突变后基因转录的mRNA在图2箭头所示位置增加了70个核苷酸，使图2序列中出现终止密码子（终止密码子有UAG、UGA和UAA）。突变基因转录的mRNA中，终止密码子为 ，突变基因表达的蛋白质含 个氨基酸。‎ ‎28．若要检测两种抗生素对产脲酶细菌的抑菌效果，下图所示对照设计最为合理的是_____。‎ ‎【解析】解：25．已知该酶可以特异性的催化尿素放出氨和二氧化碳，要想筛选出它就可以以尿素作为唯一氮源；培养基的灭菌条件121℃、1．05kg/cm2、15-30分钟，因为只有在该条件下才能杀死大部分细菌和芽孢。‎ ‎26．稀释已经后面的涂布方法都是为了获得单菌落，便于实验观察。‎ ‎27．细菌是原核一细胞，所以遗传物质主要存在于拟核和质粒上，终止密码子题目已经给出，当在箭头上加70个核酸时，前面总共有273个核酸，70个核酸可以分为69和1，连接上后面的就是XAGUGA--，其中UGA为终止密码子；前面总共有273+69+3=345个核酸，可以翻译115个氨基酸。‎ ‎28．要检测两种抗生素对产脲酶细菌的抑菌效果，应该用控制变量法来用检测，并且设置一个空白对照组。‎ ‎【答案】‎ ‎25．尿素 ；121℃、1．05kg/cm2、15-30分钟；杀死细菌和芽孢 ‎26．获取单一菌落；（稀释）涂布法 ‎27．拟核和质粒上； UGA； 115    28．C ‎【2017年松江一模】‎ ‎12．请回答有关基因工程的问题（10分）。‎ GDNF是一种神经营养因子，对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。‎ ‎45．一个GDNF基因含有 个游离的磷酸基团，理论上而言，与GDNF基因含有相同碱基数的DNA分子共有 种不同的排序。‎ ‎46．限制酶的特点是___________________________，构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的 限制酶进行酶切。‎ ‎47．下列有关基因工程的运载体中标记基因的说法正确的是 （多选）。 ‎ A．可检测重组DNA分子是否导入了受体细胞 B．可指示受体细胞是否导入运载体 C．可指示运载体中是否插入了外源DNA片段 D．可检测目的基因在受体细胞中是否成功表达 ‎48．通常使用限制酶后会产生粘性末端，对下图所示粘性末端的说法正确的是 (多选)。‎ A．甲、乙、丙粘性末端是由各自不同的限制性核酸内切酶催化产生的 B．甲、乙具相同的粘性末端可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能 C．DNA连接酶作用位点在b处，催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键 D．切割甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子 49． 经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、‎ GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第 泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。‎ ‎【解析】解：45．基因是由DNA双链构成，它含有两个游离的磷酸基团；该基因有700bp即有700个碱基对，那么它的可能组合为4700。‎ ‎46．限制性内切酶的特点是可以识别特异的DNA序列并切割它；选择的内切酶要求是能把完整的基因给切割出来，由图知 XhoⅠ。‎ ‎47．略 ‎48．粘性末端由内切酶识别特异性DNA片段切割而来，碱基互补配对的粘性末端可以相互连在一起；DN连接酶的作用点是连接磷酸二酯键，催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键；B为氢键。‎ ‎49．略 ‎【答案】45．2个 4700‎ ‎46．特异性的识别并切割DNA XhoⅠ ‎47．ABC ‎48．ABD ‎49． 2‎ ‎ ‎