【生物】2021届 一轮复习 人教版 微生物的利用 作业

【生物】2021届 一轮复习 人教版 微生物的利用 作业

第十单元　生物技术实践 专题24　微生物的利用 探考情　悟真题 ‎【考情探究】‎ 考点 考向 要求 ‎5年考情 预测热度 考题示例 素养要素 难度 ‎1‎ 微生物的培养 培养基与纯化培养 实验与 探究 ‎2018课标全国 Ⅱ,37,15分 科学探究、‎ 社会责任 中 ‎★★★‎ ‎2‎ 微生物的分离与计数 微生物的分离与计数 ‎2019课标全国 Ⅰ,37,15分 中 ‎★★★‎ 分析解读　本专题包括微生物的培养,特定微生物的纯化、计数等内容。试题情境贴近生活、生产,考查利用所学生物知识解决实际问题的能力,如利用选择培养基筛选目标微生物,以制备特定产品、治理污染等。也有与传统发酵技术内容融合考查,试题难度适中。复习时应注意:熟记微生物培养、纯化基础知识,通过剖析典型例题,构建微生物培养、筛选、计数题型的解题模板。‎ ‎【真题探秘】‎ 破考点　练考向 考点一　微生物的培养 ‎【考点集训】‎ 考向　培养基与纯化培养 ‎　　　　　　 　　　　　　 　　　　　　 ‎ ‎1.(2020届甘肃天水一中月考,37,15分)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列,菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者,可根据噬菌体的宿主专一性,通过实验确诊。‎ ‎(1)细菌培养:采集疑似患者的样本,分离培养,获得可疑菌落。‎ ‎(2)细菌鉴定:实验流程如图所示。‎ ‎①对配制的液体培养基等需采取　　　　　　　　　　法进行灭菌;实验所用液体培养基的碳源为　　　　(选填“无机碳”或“有机碳”)。 ‎ ‎②挑选可疑菌落制片后,用　　　　观察,可看到呈竹节状排列的杆菌。 ‎ ‎③接种可疑菌后,35 ℃培养24小时,液体培养基变浑浊,原因是　　　　　　　　　　。对照组试管中应加入　　　　　　　　,与实验组同时培养6小时后,若实验组液体培养基的浑浊度比对照组　　　　(选填“高”或“低”),则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染;反之则排除。 ‎ ‎④对排除的疑似患者及易感人群,可接种炭疽杆菌疫苗,刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外,还有　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(2)①高压蒸汽灭菌　有机碳　②显微镜　③细菌大量繁殖　等量生理盐水　低　④吞噬细胞、效应B细胞(或浆细胞)‎ ‎2.(2019新疆乌鲁木齐质检,37,7分)有机物M是一种难降解的有害污染物。科研人员利用有机物M、磷酸盐、镁盐以及一些微量元素配制的培养基,成功筛选出了能有效降解有机物M的细菌。实验的流程如图所示。请分析回答问题:‎ ‎(1)培养基中加入有机物M的目的是筛选　　　　　　　　　　　,这种培养基属于　　　培养基。 ‎ ‎(2)目的菌生长所需要的碳源来自培养基中的　　　　　　　,实验中需要振荡培养,由此推测该菌的细胞呼吸类型是　　　　　　。 ‎ ‎(3)培养一段时间后,应选择培养液中有机物M含量　　　的培养瓶,将其中的细菌转为固体培养,图中采用了　　　　　法接种,培养后可获得单个菌落。 ‎ ‎(4)实验结束后,使用过的培养基应该进行　　　处理后才能倒掉。 ‎ 答案　(1)能降解有机物M的细菌　选择　(2)有机物M　好氧型(或需氧型)　(3)最少　平板划线　(4)灭菌(或无害化)‎ 考点二　微生物的分离与计数 ‎【考点集训】‎ 考向　微生物的分离与计数 ‎1.(2020届河北、安徽名校联盟联考,36,15分)黄曲霉素是由黄曲霉和寄生曲霉等产生的代谢产物,具有极强的毒性和致癌性,主要污染粮油及其制品,科研人员用黄曲霉素B1(AFB1)的结构类似物——香豆素(C9H6O2)筛选出能高效降解AFB1的菌株。请回答下列问题:‎ ‎(1)为了筛选到AFB1降解菌,常从霉烂的花生、玉米和棉花中采样,原因可能是 ‎ ‎　。 ‎ ‎(2)筛选AFB1降解菌时,培养基中唯一的碳源是　　　　,加入琼脂的目的是　　　　　　　　　　　　　　。接种后,培养基中AFB1降解菌的数量会逐渐　　　　。 ‎ ‎(3)菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种,实验小组对降解菌的发酵液进行离心,分别用上清液和沉淀物制成的菌悬液降解AFB1,发现上清液中AFB1的残留率明显低于菌悬液。‎ ‎①分析以上信息可知,菌体降解AFB1的途径主要是　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎②经检测发现上清液中存在多种蛋白质,请设计实验验证蛋白质K是降解AFB1的有效成分,要求简要写出实验思路和预期结果(实验材料:培养过降解菌的上清液、蛋白质K水解酶、含AFB1的培养液)。‎ 答案　(1)霉烂的花生、玉米和棉花中富含AFB1,可能含有较多的AFB1降解菌 ‎(2)香豆素　作为凝固剂,制备固体培养基　增多 ‎(3)①胞外分泌物降解　②实验思路:取两试管编号甲、乙,分别加入等量的培养过降解菌的上清液,甲组加入适量的蛋白质K水解酶,乙组不作处理,一段时间后将甲、乙组培养液分别加入含AFB1的培养液中,一段时间后检测AFB1含量(说明:写出实验组和对照组)‎ 预期结果:甲组的AFB1未被降解,乙组的AFB1被降解(或甲组AFB1的降解率小于乙组)‎ ‎2.(2020届四省八校联考,37,15分)某研究小组对自来水和污染河水水样中的大肠杆菌含量进行了测定。回答下列问题。‎ ‎(1)检测自来水中大肠杆菌的数量,可选用伊红美蓝培养基。该培养基除了为大肠杆菌的生长、繁殖提供水和氮源外,还要提供　　　　　　　　　两类基本营养成分;制备该培养基时应在灭菌之　　(填“前”或“后”)调整pH至7.6,以满足大肠杆菌生长的要求;该培养基中加入伊红美蓝的作用是　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)研究小组使用“滤膜法”对污染严重的河流水体进行大肠杆菌活菌数的测定,需将水样进行适当稀释,如取水样1 mL加入　　　　 mL无菌水制备稀释倍数为10倍的稀释液,并照此依次制备更高倍数的稀释液。取每个稀释倍数的菌液5 mL进行过滤,然后将滤膜放置在伊红美蓝培养基上培养。如果经过培养后,稀释倍数为103 倍对应的4个平板上菌落数分别为43、47、42、48个,那么每升河水约含大肠杆菌　　　　 个。 ‎ ‎(3)用上述方法统计样本中菌落数时需要设置对照组。若在调查中,某一实验组平板上菌落数平均数为46个/平板,而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落,请分析说明空白对照组出现菌落的可能原因:　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 (答出三点即可)。若将40(即46-6)个/平板作为实验组菌落数的平均值进行计算,则该做法　　　 (填“正确”或“不正确”)。 ‎ 答案　(1)碳源和无机盐(答不全不得分)　前　使大肠杆菌的菌落呈现黑色,便于对大肠杆菌计数　(2)9　9×106　(3)培养基灭菌不合格、倒平板过程被污染、培养皿灭菌不合格等　不正确 ‎【五年高考】‎ A组　统一命题·课标卷题组 ‎1.(2019课标全国Ⅰ,37,15分)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。‎ Ⅰ号培养基:在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。‎ Ⅱ号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(15 g/L)。‎ Ⅲ号培养基:氯化钠(5 g/L),硝酸铵(3 g/L),其他无机盐(适量),X(45 g/L)。‎ 回答下列问题。‎ ‎(1)在Ⅰ号培养基中,为微生物提供氮源的是　　　　。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是　　　　。 ‎ ‎(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中,培养一段时间后,不能降解X的细菌比例会　　　　,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基,若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数,接种时,应采用的方法是　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长提供　　　　　　　　　和　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)牛肉膏、蛋白胨　X　(2)下降　不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的细菌能够增殖　(3)稀释涂布平板法　(4)能量　合成其他物质的原料 ‎2.(2019课标全国Ⅱ,37,15分)物质W是一种含氮有机物,会污染土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌(目标菌)。回答下列问题。‎ ‎(1)要从土壤中分离目标菌,所用选择培养基中的氮源应该是　　　　。 ‎ ‎(2)在从土壤中分离目标菌的过程中,发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落(如图所示)。如果要得到目标菌,应该选择　　　　菌落进一步纯化,选择的依据是　　　　　　　　　　　　 　　　。 ‎ ‎(3)土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源。若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用空气中的氮气作为氮源,请简要写出实验思路、预期结果和结论,即　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌,使大肠杆菌产生能降解W的酶(酶E)。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异,该小组拟进行如下实验,请完善相关内容。‎ ‎①在含有一定浓度W的固体培养基上,A处滴加含有酶E的缓冲液,B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液,C处滴加　　　　,三处滴加量相同。 ‎ ‎②一段时间后,测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈,说明　　　　　　　　　　　;若A、B处形成的透明圈直径大小相近,说明　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)W　(2)乙　乙菌落周围出现透明圈,说明乙菌能降解W　(3)将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上,若细菌能生长,则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源　(4)①缓冲液　②缓冲液不能降解W　酶E与天然酶降解W的能力相近 ‎3.(2019课标全国Ⅲ,37,15分)回答下列与细菌培养相关的问题。‎ ‎(1)在细菌培养时,培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是　　　　(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常,制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。硝化细菌在没有碳源的培养基上　　　　(填“能够”或“不能”)生长,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)用平板培养细菌时一般需要将平板　　　　(填“倒置”或“正置”)。 ‎ ‎(3)单个细菌在平板上会形成菌落,研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过　　　　处理,这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。 ‎ 答案　(1)蛋白胨　不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同 能够　硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源　(2)倒置　(3)在一定的培养条件下,不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征　(4)灭菌 ‎4.(2018课标全国Ⅰ,37,15分)将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。‎ 回答下列问题:‎ ‎(1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制　　　的生长,加入了链霉素的培养基属于　　培养基。 ‎ ‎(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有　　　　　　(答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有　　　　　　　　(答出两点即可)。 ‎ ‎(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是　　　,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是　 　　　 　。 ‎ ‎(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:‎ 甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;‎ 乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。‎ 有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是 　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)细菌　选择　(2)碳源、无机盐　蛋白质、核酸 ‎(3)碘液　淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈　(4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差 ‎5.(2018课标全国Ⅱ,37,15分)在生产、生活和科研实践中,经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。‎ 回答下列问题:‎ ‎(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具　　　　(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。 ‎ ‎(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,这两种方法的优点是　　　　‎ ‎　　　　 　。 ‎ ‎(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒,其原因是紫外线能　　　　　　　　　。在照射前,适量喷洒　　　　　　,可强化消毒效果。 ‎ ‎(4)水厂供应的自来水通常是经过　　　　(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。 ‎ ‎(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时,若压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度,最可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)可以　(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少　(3)破坏DNA结构　消毒液　(4)氯气　(5)未将锅内冷空气排尽 ‎ ‎6.(2018课标全国Ⅲ,37,15分)回答下列与酵母菌有关的问题:‎ ‎(1)分离培养酵母菌通常使用　　　　　　　(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基,该培养基应采用　　　　　　灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到菌落,菌落的含义是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进　　　　　　　(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进　　　　　　(填“菌体快速增殖”“乙醇产生”或“乳酸产生”)。 ‎ ‎(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(1)麦芽汁琼脂　高压蒸汽　由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体　(2)菌体快速增殖　乙醇产生　(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软 ‎7.(2017课标全国Ⅰ,37,15分)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答下列问题:‎ ‎(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生　　　。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出两点即可)。 ‎ ‎(2)为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时,应选择　　　(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其他两组的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 。 ‎ ‎(3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出两点即可)。 ‎ 答案　(1)脲酶　分解尿素的细菌是异养生物,不能利用CO2来合成有机物　为细胞生命活动提供能量,为其他有机物的合成提供原料 ‎(2)尿素　其他两组都含有NH4NO3,能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用 ‎(3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定 ‎8.(2016课标全国Ⅲ,39,15分,0.24)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明,乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题:‎ ‎(1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用　　　　对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的理由是　 　　‎ ‎　　　 　　　。‎ ‎(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有　　　　　　　　　　　　和　　　　　　　　。分离纯化时应挑选出　　　　　　　　　　　　的菌落作为候选菌。 ‎ ‎(3)乳酸菌在-20 ℃长期保存时,菌液中常需要加入一定量的　　　　(填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”)。 ‎ 答案　(1)无菌水(2分)　泡菜滤液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落(3分)‎ ‎(2)鉴别乳酸菌　中和产生的乳酸(或酸)(每空3分,共6分)　具有透明圈(2分)‎ ‎(3)甘油(2分)‎ ‎9.(2015课标全国Ⅰ,39,15分,0.6127)已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题:‎ ‎(1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用　　　　染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可选用　　　　(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。 ‎ ‎(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以　　　　为碳源的固体培养基进行培养。 ‎ ‎(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用　　　　　直接计数;若要测定其活菌数量,可选用　　　　　　法进行计数。 ‎ ‎(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35 ℃、40 ℃、45 ℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg,则上述三个温度中,　　　　℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕　　　　℃设计后续实验。 ‎ 答案　(1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)　萃取法(每空2分,共4分)‎ ‎(2)油脂(3分)‎ ‎(3)血细胞计数板　稀释涂布平板(每空2分,共4分)‎ ‎(4)45　40(每空2分,共4分)‎ 教师用书专用 ‎10.(2014课标全国Ⅰ,39,15分)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:‎ ‎(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将　　　　分解成　　　　。 ‎ ‎(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成　　　　色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的　　　　。 ‎ ‎(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):‎ 酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液 水 培养基甲 ‎+‎ ‎+‎ ‎+‎ ‎+‎ ‎-‎ ‎+‎ ‎+‎ 培养基乙 ‎+‎ ‎+‎ ‎+‎ ‎-‎ ‎+‎ ‎+‎ ‎+‎ 注:“+”表示有,“-”表示无。‎ 据表判断,培养基甲　　　　(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　;培养基乙　　　　(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是　 　。 ‎ 答案　(1)纤维二糖　葡萄糖　(2)红　透明圈　(3)不能　液体培养基不能用于分离单菌落　不能　培养基中没有纤维素,不会形成CR—纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌 ‎11.(2014课标全国Ⅱ,39,15分,0.5527)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:‎ ‎(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是　 ; 然后,将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为　　　　。 ‎ ‎(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过　　　　灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是　 。 ‎ ‎(3)示意图A和B中,　　　　表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。 ‎ ‎(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中　　　的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高　　　　　　的利用率。 ‎ 答案　(15分)(1)检测培养基平板灭菌是否合格　3.8×107(每空2分,共4分)‎ ‎(2)灼烧(2分)　将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3分)‎ ‎(3)B(2分)‎ ‎(4)溶解氧　营养物质(每空2分,共4分)‎ ‎12.(2013课标全国Ⅱ,39,15分,0.5633)临床使用抗生素前,有时需要做细菌耐药实验。实验时,首先要从病人身上获取少量样本,然后按照一定的实验步骤操作,以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。‎ 回答下列问题:‎ ‎(1)为了从样本中获取致病菌单菌落,可用　　　　法或　　　　法将样本接种于固体培养基表面,经过选择培养、鉴别等步骤获得。 ‎ ‎(2)取该单菌落适当稀释,用　　　　法接种于固体培养基表面,在37 ℃培养箱中培养24 h,使其均匀生长,布满平板。 ‎ ‎(3)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A　　　　;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生素B　　　　;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明　 ; 含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的　　　　。 ‎ ‎(4)根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好应选用抗生素　　　　。 ‎ 答案　(15分)‎ ‎(1)划线　稀释涂布(或涂布)(每空2分,共4分)‎ ‎(2)涂布(1分)‎ ‎(3)敏感　不敏感　该致病菌对C的敏感性比对A的弱　耐药菌(每空2分,共8分)‎ ‎(4)A(2分)‎ ‎13.(2011课标,39,15分)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题:‎ ‎(1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以　　　　为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲,该培养基属于　　　　培养基。 ‎ ‎(2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即　　　　和　　　　。 ‎ ‎(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力　　　　。 ‎ ‎(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、　　　　和　　　　。无菌技术要求实验操作应在酒精灯　　　　附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。 ‎ 答案　(1)原油　选择 ‎(2)平板划线法　稀释涂布平板法 ‎(3)强 ‎(4)干热灭菌　高压蒸汽灭菌　火焰 ‎14.(2009全国Ⅱ,33,10分)利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆,具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低,某同学尝试对其进行改造,以获得高效菌株。‎ ‎(1)实验步骤:‎ ‎①配制　　　　　　(固体、半固体、液体)培养基,该培养基的碳源应为　　　　　　　　　　。 ‎ ‎②将　　　　接入已灭菌的培养基平板上。 ‎ ‎③立即用适当剂量的紫外照射,其目的是　　　　　　　　　　。 ‎ ‎④菌落形成后,加入碘液,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小,周围出现　　　　　　　　　　现象的菌落即为初选菌落。经分离、纯化后即可达到实验目的。 ‎ ‎(2)若已得到二株变异菌株Ⅰ和Ⅱ,其淀粉转化率较高。经测定菌株Ⅰ淀粉酶的催化活性高,菌株Ⅱ的淀粉酶蛋白含量高。经进一步研究发现,突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区,可推测出菌株Ⅰ的突变发生在　　　　区,菌株Ⅱ的突变发生在　　　　区。 ‎ 答案　(1)①固体　玉米淀粉　②野生菌株　③对野生菌株进行诱变　④浅色范围大　(2)编码　非编码 B组　自主命题·省(区、市)卷题组 ‎1.(2018江苏单科,31,8分)酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。下图所示为操作流程,请回答下列问题:‎ ‎(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的　　　　,及时对培养基进行分装,并进行　　　　　　　　灭菌。 ‎ ‎(2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约　　　　(在25 ℃、50 ℃或80 ℃中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。 ‎ ‎(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有　　　　　　　。 ‎ a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌 b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落 c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量 d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株 ‎(4)步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和　　　　供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1 000 倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5 个中格中的细胞数,理论上　　　　色细胞的个数应不少于　　　　,才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。 ‎ 答案　(8分)‎ ‎(1)pH　高压蒸汽(湿热)　(2)50 ℃　(3)a、b、d ‎(4)氧气　无　30‎ ‎2.(2017江苏单科,31,7分)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题:‎ ‎(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有　　　　　　　。 ‎ ‎(2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐　　　　,以达到富集酚降解菌的目的。若如图平板中菌落过于密集,应进一步　　　　　　,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加　　　　。 ‎ ‎(3)如图为连续划线法示意图,在图中　　　　(填图中序号)区域更易获得单菌落。 ‎ ‎(4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为　　　　　　　　。 ‎ 管号 ‎1‎ ‎2‎ ‎3‎ ‎4‎ ‎5‎ ‎6‎ 苯酚浓度(mg/L)‎ ‎1‎ 如果废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释　　　　(填序号:①5　②10　③20)倍后,再进行比色。 ‎ 答案　(7分)(1)蛋白胨、苯酚　(2)增加　稀释涂布　凝固剂　(3)③　(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8　③‎ ‎【三年模拟】‎ 时间:30分钟　分值:70分 非选择题(共70分)‎ ‎1.(2020届河南中原名校二联,1)(10分)纤维素酶是一种重要的酶产品,目前关于常温和高温纤维素酶菌株研究较多,但有些地方气温低,需要产低温纤维素酶菌株。某实验小组通过实验室微生物筛选方法,筛选到了低温纤维素分解菌,请回答下列问题:‎ ‎(1)纤维素分解菌是能产生纤维素酶的微生物,纤维素酶是复合酶,至少包括　　　　　　　和葡萄糖苷酶。纤维素分解菌也能以葡萄糖为碳源,但是实验室中培养纤维素分解菌的培养基一般选用纤维素而不选用葡萄糖为碳源,培养基不选用葡萄糖作为碳源的原因是　 　。 ‎ ‎(2)自然界中许多真菌能产生胞外纤维素分解酶,其分解纤维素的能力远远高于细菌,真菌与细菌相比结构上的显著特点是　　　　　　　　　　　　　　　　　。若要分离出低温条件下能分解纤维素的真菌,为了防止其他微生物的繁殖,可采取的措施是　 　(至少答出两点)。 ‎ ‎(3)为方便鉴定、筛选和计数,将菌液接种到培养基上的一般方法为　　　　　　　　。 ‎ 答案　(10分,除注明外,每空2分)‎ ‎(1)C1酶、CX酶(1分)　微生物普遍可利用葡萄糖作为碳源,用葡萄糖作为碳源,其他微生物也可大量繁殖,易造成杂菌污染 ‎(2)具有以核膜为界限的细胞核　在低温环境下培养,培养基以纤维素为唯一碳源,培养基中加入一定量的抗生素(4分,回答出两项即可)‎ ‎(3)稀释涂布平板法(1分)‎ ‎2.(2020届西南名校联盟联考,37)(15分)微生物连续培养时,一部分旧的培养基以一定的速度流出,同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将JA122大肠杆菌接种到葡萄糖含量受到限制的培养基中,连续培养多代,然后取样分析培养基中存在的新菌株。请回答下列问题:‎ ‎(1)用于连续培养JA122大肠杆菌的培养基从物理性质看属于　　　　培养基,大肠杆菌与酵母菌在结构上的主要区别是大肠杆菌　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ ‎(2)样品中共发现CV101、CV103、CV116三种新菌株,产生新菌株的原因是JA122大肠杆菌发生了　　　　。 ‎ ‎(3)对三种菌株的代谢差异进行分析发现,CV103对葡萄糖吸收率最高,代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明,CV101可以在培养过CV103的培养基过滤液中生长,据此作出推测:CV101菌株能以CV103菌株产生的醋酸盐为碳源。请设计并完成下列实验步骤,来验证以上观点。‎ ‎①配制　　　　　　　　　　　　　的固体培养基(A组)和不含碳源的固体培养基(B组); ‎ ‎②将等量的适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间,并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在　　　　条件下进行。 ‎ ‎③预期实验结果:　　　　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　(15分)(1)液体(2分)　无以核膜为界限的细胞核(2分)　(2)基因突变(2分)　(3)①以醋酸盐为唯一碳源(3分)　②无菌(3分)　③A组菌株生长(形成菌落),B组菌株不能生长(无菌落)(3分)‎ ‎3.(2019陕西榆林二模,37)(15分)请回答有关微生物培养、应用和保存以及物质提取的问题:‎ ‎(1)微生物培养过程中对培养皿进行灭菌时常用的方法是　　　　　　。培养细菌时常用到的培养基是　　　　　　　　　　　　(填培养基名称)。 ‎ ‎(2)从土壤中分离尿素分解菌的过程中,应向　　　　　　　　　　的培养基中加入　　　　指示剂。 ‎ ‎(3)对于需要临时保藏的菌种,首先要将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,在合适的温度下培养,等菌落长成后,再将试管放入　　　　的冰箱中保藏。对于需要长期保存的菌种,可以采用　　　　　　的方法。 ‎ ‎(4)从胡萝卜中提取胡萝卜素时常用的方法是　　　　法。 ‎ 答案　(除标注外,每空2分,共15分)(1)干热灭菌法　牛肉膏蛋白胨培养基　(2)以尿素为唯一氮源(3分)　酚红　(3)4 ℃　甘油管藏　(4)萃取 ‎4.(2019黑龙江哈三中二模,38)(14分)枯草芽孢杆菌菌体可合成淀粉酶等消化酶,在消化道中与动物体内的消化酶类一同发挥作用,但在紫外线照射下可获得不能合成淀粉酶的突变体。研究发现紫外线处理时间过短,获得突变体不足,若紫外线处理时间过长,又会导致枯草芽孢杆菌大量死亡。为探究紫外线处理最佳时间,需测定经处理后的枯草芽孢杆菌的突变率和存活率。完成相关实验步骤:‎ ‎(1)从临时保存菌种的　　　　　　培养基中挑取菌体,制成菌液,用稀释涂布平板法或　　　　　　等方法测定枯草芽孢杆菌的浓度。 ‎ ‎(2)　　　　　　　　　　,分别用同等强度的紫外线灯处理1分钟、3分钟、5分钟。 ‎ ‎(3)将每组处理后的菌液稀释适宜倍数,吸取一定量的菌液涂布在1个　　　　　　　　　　　的培养基上,另取等量菌液涂布在1个牛肉膏蛋白胨培养基上,37 ℃培养48小时。 ‎ ‎(4)计算每个平板上菌落数。牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数可用于计算　　　　,其与另一种培养基上的菌落数的差值可用于计算　　　　　　。 ‎ ‎(5)为了使上述实验结果更精确可信,请提出一项改正措施:　　　　　　。 ‎ 答案　(1)斜面　显微计数法　(2)将菌液均分为3组　(3)以淀粉为唯一碳源　(4)存活率　突变率　(5)每组至少涂布3个平板 ‎5.(2019陕西汉中二质检,37)(16分)杀虫脒,又名氯苯脒,是一种有机氮农药,具有高效、广谱、杀虫、杀螨的作用,但长期使用容易导致土壤污染,为探究能降解杀虫脒的细菌进行了以下实验。‎ ‎(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、　　　　　、水、无机盐等,该实验所用的培养基只能以杀虫脒作为唯一氮源,其原因是　　　　　　　　　　　　　　　,从功能上讲,该培养基属于　　　　　　培养基。 ‎ ‎(2)微生物接种的方法很多,最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法,这两种方法在功能上的区别是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,此外,　　　　　　也是测定微生物数量的常用方法。 ‎ ‎(3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力　　　　　　。 ‎ ‎(4)通常情况下,在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和　　　　　　。培养基一般不使用干热灭菌的原因是　　　　　　　　　　　　。 ‎ 答案　 (1)氮源　只有能利用杀虫脒的微生物才能正常生长和繁殖　选择　(2)稀释涂布平板法可以用于统计样品中活菌数目　显微计数法　(3)强　(4)高压蒸汽灭菌　湿度低会破坏培养基中的营养成分