【生物】2020届一轮复习微生物的利用作业

【生物】2020届一轮复习微生物的利用作业

‎2020届 一轮复习 微生物的利用 作业 一、选择题 ‎1.下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是(　　)‎ A.①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行 B.步骤①中，待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖 C.步骤③中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理 D.划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养 答案　B 解析　由图可知，步骤①是倒平板，步骤②是用接种环蘸取菌液，步骤③是进行平板划线，步骤④是培养。①②③步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，A项正确；倒完平板后应立即盖上培养皿的皿盖，冷却后将平板倒过来放置，B项错误；每次划线前后灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单菌落，C项正确；划线接种结束后，将平板倒置放入培养箱中培养，有利于培养基表面的水分更好地挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D项正确。‎ ‎2.下列关于大肠杆菌的培养的叙述，不正确的是(　　)‎ A.在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑pH、温度和渗透压等条件 B.若对大肠杆菌活菌进行计数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品的稀释度合适 C.在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行消毒 D.使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃 答案　C 解析　微生物培养条件有营养条件、pH、温度、渗透压等，A正确；为计数活菌数，要多次实验求平均值、操作要严格，还要保证样品的稀释度合适，便于检测，B正确；为防止杂菌污染，对培养基和培养皿要进行灭菌，C错误；为防止对环境的污染，用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，D正确。‎ ‎3.下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是(　　)‎ A.操作前要将接种环放在火焰旁灭菌 B.划线操作应在火焰上进行 C.在5区域中才有可能得到所需菌落 D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌 答案　D 解析　操作前要将接种环放在火焰上灼烧灭菌，A项错误；划线操作应在火焰旁进行，B项错误；在5区域中最有可能得到所需菌落，C项错误；在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌，D项正确。‎ ‎4.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌(　　)‎ A.接种环、手、培养基 B.高压锅、手、接种环 C.培养基、手、接种环 D.接种环、手、高压锅 答案　C 解析　一般来说，灭菌是指彻底杀灭微生物，使其永远丧失生长繁殖的能力，对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。消毒仅指杀死物体表面或内部一部分微生物，而对被消毒的物体基本无害，操作者的手需要消毒。高压蒸汽灭菌锅是灭菌设备，通常用于培养基的灭菌；用酒精擦拭双手是消毒的一种方法；火焰灼烧可以迅速彻底灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。‎ 二、非选择题 ‎5.(2019·嘉兴模拟)自生固氮菌是一种能独立固定氮气的细菌，其中有些好氧种类能产生PHB(一种生物可降解的热塑性塑料)。现欲从活性污泥中分离、纯化、筛选出高产PHB的固氮菌，操作流程如下：采集土样→富集培养→分离、纯化培养→初步筛选PHB固氮菌→筛选高产PHB固氮菌→保存备用。请回答：‎ ‎(1)富集培养时，为达到筛选自生固氮菌的目的，在配制培养液时不应添加______。培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上振荡培养，其目的是为细菌的生长提供_______。‎ ‎(2)筛选高表达量菌株的方法之一是经涂布分离获得________。进行分离、纯化培养时，要先将培养基倒入________中，制成平板，此时所使用的培养基与富集培养时有所不同，添加了一定量的________。‎ ‎(3)在纯化过程中，在固体培养基上划线时，下列操作正确的是________。‎ A.接种环采用70%酒精灭菌 B.接种时应在酒精灯火焰附近进行 C.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连 D.划线分离时，需要把接种环深入培养基中进行接种 答案　(1)含氮物质(或氮源)　充足的氧气　(2)单菌落　培养皿　琼脂糖　(3)B ‎6.(2018·浙江五校9月联考)某村庄有一条小溪，近几年由于上游几家乳胶厂不断向其中排放废水，小溪变得不再清澈。某同学想测定该溪水中的细菌含量情况。回答下列问题：‎ ‎(1)先根据所学知识制备LB培养基。制备该培养基的步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，下列关于制备LB培养基的叙述，错误的是________。‎ A.培养基应先调pH再进行灭菌 B.培养基应先灭菌再分装到培养皿 C.溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦 D.灭菌时一般用高压蒸汽灭菌锅在121℃，500g/cm2压力下灭菌15分钟 ‎(2)该同学利用上述制备的培养基来检测水样中的细菌数量，他所选择的分离方法应是________________；该同学在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________。接种在超净工作台上进行，工作台上实验前一段时间需打开，实验中需关闭的是________(A.酒精灯　B.照明灯　C.紫外线　D.过滤风)。‎ ‎(3)值得注意的是，他所选择的这种方法统计的结果往往比实际细菌的数目要低，这是因为(不考虑实验操作原因引起的细菌数目的变化)：‎ ‎①________________________________________________________________________‎ ‎________________________________________________________________________。‎ ‎②________________________________________________________________________‎ ‎________________________________________________________________________。‎ ‎(4)该同学欲将所分离出的某种细菌临时保藏，应接种到试管的________培养基上，等菌落长成后，放入冰箱低温保藏。‎ 答案　(1)D　(2)涂布分离法　检查平板灭菌是否彻底　C　(3)①该方法只能统计样品中活菌的数目，死菌无法统计　②当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落　(4)斜面 解析　(1)要想测定该溪水中的细菌含量情况，需先根据所学知识制备LB培养基，制备该培养基的步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。制备LB培养基时，培养基应先调pH再进行灭菌，A正确；培养基应先灭菌再分装到培养皿，B正确；溶化琼脂时不能使培养基溢出或烧焦，C正确；灭菌时一般用高压蒸汽灭菌锅在121℃，1000g/cm2压力下维持15分钟，D错误。‎ ‎(2)用上述制备的培养基来检测水样中的细菌数量时，选择的分离方法应是涂布分离法；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检查平板灭菌是否彻底；接种在超净工作台上进行，工作台上实验前一段时间需打开，实验中需关闭的是紫外线，以防止紫外线对人体造成伤害。‎ ‎(3)用涂布分离法检测水样中的细菌数量时，统计结果往往比实际细菌数目低的原因：①该方法只能统计样品中活菌的数目，死菌无法统计；②当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。‎ ‎(4)临时保藏菌种时，应将菌种接种到试管的斜面培养基上，等菌落长成后，放入冰箱低温保藏。‎ ‎7.(2018·浙江金丽衢十二校联考)镉是工业废水中常见的污染物，对人体的伤害极大，被我国环保法列为一类污染物。一些微生物可以分泌多聚糖、糖蛋白、脂多糖、可溶性氨基酸等胞外聚合物，这些聚合物具有络合或沉淀金属离子的特点，从而起到净化工业废水中重金属盐的功能。某同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选镉降解高效菌株。请回答下列问题：‎ ‎(1)______是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。‎ ‎(2)镉降解菌富集培养基中含有蛋白胨、镉、葡萄糖、水等物质，则其在进行灭菌时应控制压力在______________。分离时应取不同浓度的稀释液______mL涂布到平板上。‎ ‎(3)下图为划线分离法分离纯化细菌，整个实验过程需要将接种环灼烧灭菌________次。‎ A.2B.3C.4D.5‎ ‎(4)采用光电比色测定法检测降解后的废水中镉留量。在制备标准曲线实验过程中，应分别以______________为横、纵坐标绘制曲线。‎ 答案　(1)单菌落的分离　(2)500g/cm2　0.1　(3)C　(4)镉浓度、光密度值 解析　(1)单菌落的分离是消除污染杂菌的通用方法。‎ ‎(2)镉降解菌富集培养基中含有蛋白胨、镉、葡萄糖、水等物质，则其在进行灭菌时应控制压力在500g/cm2。分离时应取不同浓度的稀释液0.1mL涂布到平板上。‎ ‎(3)根据图中划线分离法中划线的方向和起始端可知，整个实验过程中划了3次线，而每一次划线前后都需要将接种环灼烧灭菌，所以一共需要灭菌4次，故选C。‎ ‎(4)绘制标准曲线时应以镉浓度为横坐标，光密度值为纵坐标，其中各组的镉浓度应该设置等浓度梯度。‎ ‎8.下图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程，请回答下列问题：‎ ‎(1)该实验培养基不能含有____________。‎ A.尿素B.氯化钠C.葡萄糖D.琼脂 ‎(2)尿素溶液可用__________________使之无菌。若要检查B过程灭菌是否彻底，可以采用的方法是____________________________________________________________________。‎ ‎(3)图中步骤C为______。相对于划线分离法，过程D涂布分离法的优点是_________。‎ ‎(4)如果菌落周围出现____________色环带，说明该菌落能分泌脲酶。‎ 答案　(1)D　(2)G6玻璃砂漏斗过滤　将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落出现　(3)倒平板　单菌落更易分开　(4)红 解析　(1)分离以尿素为氮源的微生物，应该以尿素为唯一氮源，所以不应有琼脂。(2)尿素溶液用G6玻璃砂漏斗过滤除去其中的细菌等微生物。(4)若菌落能分泌脲酶，则菌落周围会出现红色环带。‎ ‎9.(2018·宁波期末测试)石油烃是环境的重要污染源。为了筛选出具有强分解石油烃能力的微生物，进行了一系列操作，请回答下列问题：‎ ‎(1)分解石油烃的微生物一般要从土壤中分离，获取土壤样品的取样地点最好选在_____。‎ ‎(2)微生物实验室采用________法对培养基进行灭菌处理。‎ A.干热灭菌 B.过滤灭菌 C.灼烧灭菌 D.高压蒸汽灭菌 ‎(3)下图为获取土壤样品后的培养研究过程：‎ 为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程①～④所用培养基的成分的特点是______，从而有利于分解石油烃的微生物的生长。‎ ‎(4)对④进行接种常采用的两种方法分别是___________________和________________。‎ ‎(5)若发现在⑤中无法区分菌落，可以将图中③取出的菌液________________。‎ ‎(6)若实验室为分离纯化优良菌种进行了如下操作，排序最合理的是________。‎ A.②①④③ B.②①④①③②‎ C.②①④②③② D.①④①③②‎ ‎(7)整个微生物的分离和培养的操作，一定要注意在________条件下进行。‎ 答案　(1)石油污染明显处　(2)D　(3)以石油烃作为唯一碳源　(4)划线分离法　涂布分离法　(5)进行(梯度)稀释　(6)B　(7)无菌 解析　(1)分解石油烃的微生物在石油污染明显处分布较多。(2)微生物实验室常用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌。(3)实验过程中，过程①～④所用培养基应用石油烃作为唯一碳源，以抑制其他种类微生物的生长，从而分离出以石油烃为碳源的微生物。(4)在微生物的分离实验中，常用划线分离法和涂布分离法进行接种。(5)若发现在⑤中无法区分菌落，可能是菌液中细菌浓度太高，可进行梯度稀释处理后再进行接种。(6)图示为用划线分离法进行接种分离。接种过程中应先在酒精灯火焰上灼烧接种环后，蘸取菌液进行接种，整个操作在酒精灯火焰旁进行，接种结束后还应在酒精灯上灼烧接种环。(7)为避免污染，整个微生物的分离和培养的操作，一定要注意在无菌条件下进行。‎ ‎10.(2018·浙江教育绿色评价联盟3月模拟)经人工诱变获得的天冬氨酸缺陷型菌株，菌株自身不能合成天冬氨酸，必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。如图是科研人员利用“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株的部分过程(注：基本培养基中不含氨基酸，完全培养基中含所有种类的氨基酸)。回答下列问题：‎ ‎(1)过程①接种时必需使用的工具是_______________；待测培养皿中的培养基是________(填“基本”或“完全”)培养基。‎ ‎(2)过程②是将印在同一块丝绒布上的菌落，先后转印至两个不同的平板上。该过程应该先转印到________培养基上，原因是______________________________________________。‎ ‎(3)经过程②，完全培养基上出现的菌落A和菌落B中，不可能含天冬氨酸缺陷型菌株的是________菌落；为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株，科研人员又制备了甲、乙两个平板，这两个平板培养基中营养成分的差异是________________。‎ ‎(4)下列对上述“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株过程的叙述，错误的是________。‎ A.过程①接种前还需对菌液进行梯度稀释，每次接种时取菌液0.1mL B.过程①、②中菌落培养时应将平板倒置并放在28℃恒温培养箱中 C.过程②丝绒布在两个培养基上覆盖的方向和角度可不必相同 D.影印和接种等操作均最好在超净台的酒精灯火焰旁进行 答案　(1)玻璃刮刀(或三角刮刀)　完全 ‎(2)基本　防止基本培养基中混入氨基酸 ‎(3)B　是否含有天冬氨酸 ‎(4)C 解析　(1)涂布法接种时，需要使用玻璃刮刀(或三角刮刀)；待检测培养皿中为完全培养基，野生型和突变型菌都能存活。(2)影印过程中应该先转印到基本培养基上，这样可以防止将完全培养基中的氨基酸混入基本培养基而影响实验效果。(3)比较基本培养基和完全培养基的菌落可知，B菌落在基本培养基上能生长繁殖，说明它能合成天冬氨酸，不可能是天冬氨酸缺陷型菌株，筛选得到的可能是其他多种氨基酸缺陷型细菌，为进一步鉴定筛选天冬氨酸缺陷型菌株，通过缺少天冬氨酸的培养基可以筛选天冬氨酸缺陷型菌株。(4)影印法是通过比较完全培养基和基本培养基菌落的存活情况筛选所需的菌落，因此丝绒布在两个培养基覆盖的方向和角度要相同。‎