2019-2020学年生物人教版选修1同步检测：专题综合检测（二）

2019-2020学年生物人教版选修1同步检测：专题综合检测（二）

专题综合检测(二) 一、选择题(每小题 2 分，共 20 分) 1．下列关于微生物营养物质的描述，正确的是( ) A．同一物质不可能既作碳源又作氮源 B．除水以外的无机物，仅可为微生物培养提供无机盐 C．凡是碳源都能提供能量 D．无机氮源也能提供能量 解析：对异养微生物来说，含 C、H、O、N 的化合物既是碳 源，又是氮源，如牛肉膏，A 项错误；CO2 和 N2 是无机物，也是 某些微生物的碳源和氮源，B 项错误；有机碳源能提供能量，无 机碳源不能提供能量，C 项错误；自然界中一些微生物如硝化细 菌，可以以无机氮源合成细胞物质，同时通过氧化外界无机物获 得生长所需能量，叫做化能合成作用，D 项正确。 答案：D 2．稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。 下列相关叙述错误的是( ) A．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释 B．需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面 C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落 D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理 解析：稀释涂布平板法，包括系列稀释和涂布平板两个过程， 涂布平板之前需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释，A 项正确； 涂布平板时，需要将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表 面，B 项正确；只有稀释度足够大的菌液才能在培养基表面形成 单个的菌落，C 项错误；操作过程中对培养基和涂布器等均需进 行严格灭菌处理，以防止杂菌污染，D 项正确。 答案：C 3．[2019·四川高二期末]下列与分离分解纤维素的微生物实验 有关的说法，错误的是( ) A．鉴别培养基中的 CMC—Na 能为纤维素分解菌提供碳源 B．纤维素分解菌的选择培养基只能以纤维素粉作为唯一碳源 C．两种刚果红染色法筛选出来的目的菌不一定都能分解纤维 素 D．实验可以通过是否产生透明圈来筛选能分解纤维素的目的 菌 解析：CMC—Na 是天然纤维素经化学改性后得到的纤维素衍 生物，是纤维素的羧甲基醚化物，能为纤维素分解菌提供碳源，A 项正确；纤维素分解菌的选择培养基不一定选择纤维素粉作为唯 一碳源，可以选择那些富含纤维素的物质，如滤纸等，B 项错误； 两种刚果红染色法筛选出来的目的菌不一定都能分解纤维素，可 能还会生长一些能利用纤维素分解的产物——葡萄糖的微生物，C 项正确；通过分析可知，实验可以通过是否产生透明圈来筛选能 分解纤维素的目的菌，D 项正确。 答案：B 4．下列有关微生物培养的说法，正确的是( ) A．制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、 调 pH、倒平板 B．筛选纤维素分解菌时，要将土壤稀释液接种到含有纤维素 的固体培养基 C．配置培养不同微生物的培养基时都要将 pH 调至中性或微 碱性 D．在无氮培养基中加入酚红指示剂可用来鉴定尿素分解菌 解析：制备固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、调 pH、灭菌、倒平板，A 项错误；纤维素分解菌可以将纤维素分解， 而其他微生物不能，因此筛选纤维素分解菌时，要将土壤稀释液 接种到含有纤维素的固体培养基，B 项正确；不同的微生物培养 需要的 pH 是不同的，如培养细菌时需将培养基的 pH 调至中性或 微碱性，C 项错误；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指 示剂可用来鉴定尿素分解菌，D 项错误。 答案：B 5．关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是( ) ①将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解 ②等培养基冷却 40 ℃左右时进行倒平板 ③待平板冷却凝固 5～10 分钟后将平板倒过来放置 ④操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 ⑤牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素 A．①④⑤ B．②③④ C．①②③ D．②④⑤ 解析：将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量 的水，加热，①正确；待培养基冷却至 50 ℃左右时，在酒精灯火 焰附近倒平板，②错误；待平板冷却凝固约 5～10 min 后，将平板 倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，③正确；制备牛肉膏蛋白 胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、灭菌、倒平板， ④错误；蛋白胨只能提供碳源、氮源、维生素，⑤错误。 答案：D 6．[2019·西宁市海湖中学高二月考]下列有关培养基配制原则 的叙述，不正确的是( ) A．异养微生物的培养基至少要有一种有机物 B．任何培养基都必须含有水、碳源、氮源、无机盐及生长因 子 C．配制培养基时，要注意各种营养物质的浓度和比例 D．微生物的生长除受营养因素影响外，还受到 pH、氧、渗 透压的影响 解析：对于异养微生物，其不能利用无机碳源，只能利用含 碳有机物作为碳源，因此对异养微生物的培养必须含有有机物，A 项正确；虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳 源、氮源和无机盐。有些微生物可以固定空气中的碳元素或者氮 元素，因此不需要培养基中额外添加碳源或者氮源。自养微生物 一般不需要生长因子，有些异养微生物需要生长因子，因此生长 因子不是共有的，B 项错误；根据微生物种类及培养目的不同， 其培养基的配方一般不同，因此需要注意不同微生物所需各种营 养物质的浓度和比例，C 项正确；微生物的生长不仅受营养因素 如碳源、氮源、无机盐及生长因子的影响外，还受外界因素如 pH、 氧、渗透压等的影响，D 项正确。 答案：B 7．[2019·武汉市钢城第四中学高二期中]下列有关土壤微生物 的培养和分离的叙述，正确的是( ) A．土壤的称取和土壤溶液的稀释都应该在火焰旁操作 B．用于培养的培养基均必须含有碳源、氮源、无机盐和水 C．在适宜条件下培养，某培养基上的大肠杆菌将呈“J”型 增长 D．平板划线法一般划五个区域，要先将菌液稀释成 5 个不同 浓度梯度 解析：土壤的称取和土壤溶液的稀释都应该在火焰旁操作， 防止杂菌污染，A 项正确；不是所有培养基都必须含有碳源、氮 源、无机盐和水，比如自养微生物不需要碳源、固氮微生物不需 要氮源，B 项错误；在适宜条件下培养，某培养基上的大肠杆菌 将呈“S”型增长，不是“J”型增长，C 项错误；稀释涂布平板 法需要将菌液稀释，但是平板划线法一般不需要将菌液稀释，D 项错误。 答案：A 8．[2019·武汉市钢城第四中学高二期中]下列关于配制培养基 的有关叙述中，正确的是( ) A．制作固体培养基必须加入琼脂 B．培养基溶化后，要先调节 pH 再灭菌 C．氮源主要是为微生物提供能量 D．牛肉膏主要为微生物提供氮元素 解析：作固体培养基时必须加入凝固剂，琼脂是常用的凝固 剂，但不是唯一的凝固剂，A 项错误；培养基溶化后，在灭菌之 前要先调节 pH，这样做既能使培养基 pH 均匀，又能避免培养基 被污染(和灭菌后调节 pH 相比)，B 项正确；氮源主要是作为微生 物蛋白质和核酸的原料，C 项错误；牛肉膏主要为微生物提供碳 源、磷酸盐和维生素，D 项错误。 答案：B 9．[2019·黄陵中学高新部高二期末]关于微生物的实验室培 养，下列叙述错误的是( ) A．为避免污染，实验操作应在酒精灯火焰上进行 B．琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作凝固剂 C．接种环、接种针、试管口等常使用灼烧灭菌法 D．试管、烧杯、培养基等可以用高压蒸汽灭菌法灭菌 解析：为避免污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，A 项错误；琼脂在配制培养基中用作凝固剂，它是从红藻中提取的 一种多糖，B 项正确；常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高 压蒸汽灭菌法，接种环、接种针、试管口等常使用灼烧灭菌法，C 项正确；培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌，试管、烧杯等也 采用高压蒸汽灭菌法灭菌，D 项正确。 答案：A 10．[2019·天津一中高二期末]下列对不同微生物培养过程的 叙述中，正确的是( ) A．细菌培养时将 pH 调至酸性 B．霉菌培养时将 pH 调至中性或微酸性 C．培养厌氧微生物时需要提供无氧环境条件 D．培养乳酸杆菌时在培养基中不需要添加维生素 解析：细菌培养时将 pH 调至中性或弱碱性，A 项错误；霉菌 培养时将 pH 调至酸性，B 项错误；氧气会抑制厌氧微生物生长， 故培养厌氧微生物时则需要提供无氧环境条件，C 项正确；培养 乳酸杆菌时在培养基中需要添加维生素，D 项错误。 答案：C 二、非选择题(每小题 10 分，共 80 分) 11．[2019·安徽毛坦厂中学高二期末]以稻草为原料，通过纤 维素分解菌的作用可生产葡萄糖以用于开发新型能源。结合所学 知识，回答下列问题： (1)纤维素分解菌产生的纤维素酶首先将稻草纤维素分解为 ________，最终生成葡萄糖。 (2)研究人员分离分解纤维素的细菌时，使用的选择性培养基 的营养成分特点是____________________。对配制的培养基需采 用________________法灭菌。 (3)分离纯化纤维素分解菌时，可采用平板划线法，在第二次 及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是 __________________ 。 获 得 纯 净 的 纤 维 素 分 解 菌 的 关 键 是 __________________。 (4)为筛选分解纤维素的细菌一般要在培养基中添加的试剂是 ________；经一段时间培养后，应挑选周围出现________的菌落， 以筛选出纤维素分解菌。 解析：(1)纤维素分解菌产生的纤维素酶首先将稻草纤维素分 解为纤维二糖，最终生成葡萄糖。(2)研究人员分离分解纤维素的 细菌时，使用的选择性培养基的营养成分特点是仅以纤维素为唯 一碳源。对配制的培养基需采用高压蒸汽灭菌法灭菌。(3)分离纯 化纤维素分解菌时可采用平板划线法，在第二次及以后划线时， 总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌种逐 步稀释以获得单个菌落。获得纯净的纤维素分解菌的关键是防止 外来杂菌污染(无菌技术的规范操作)。(4)为筛选分解纤维素的细菌 一般要在培养基中添加的试剂是刚果红，刚果红能与培养基中的 纤维素形成红色复合物；当纤维素被分解后，红色复合物不能形 成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，故经一段 时间培养后，应挑选周围出现透明圈的菌落，以筛选出纤维素分 解菌。 答案：(1)纤维二糖 (2)仅以纤维素为唯一碳源 高压蒸汽灭菌 (3)将聚集的菌种逐步稀释以获得单个菌落 防止外来杂菌污 染(无菌技术的规范操作) (4)刚果红 透明圈 12．[2019·西宁市海湖中学高二月考]植物的细胞壁中含有大 量的纤维素，在植树和腐质土中含有许多种能产生纤维素酶分解 纤维素的微生物，已经发现并用于生产纤维素酶的菌种有绿色木 霉、变异青霉，黑曲霉和根霉等。回答以下问题： (1)上述生产纤维素酶的菌种与大肠杆菌细胞相比结构上最大 的 区 别 是 ________________________________________________________ ________________。 (2) 纤维素酶是一种复合酶，其中________酶可使纤维素分解 为纤维二糖，________酶可将纤维二糖分解成葡萄糖。 (3)在制备鉴别纤维素分解菌的培养基时为什么需要添加琼 脂，其原因____________________________________________。 若在制备培养基时加入刚果红，培养所得菌落周围出现________， 可初步判断该菌落为纤维素分解酶。 (4) 纤 维 素 分 解 菌 在 生 态 稳 态 上 起 了 什 么 作 用 ？ ________________________________。 (5)为了保持所获得菌种的纯净，需要进行菌种的保藏。若采 用临时保藏，将菌种接种在________培养基上，放入 4 ℃冰箱中 可保藏 3～6 个月；若要长期保存，可将菌液与灭菌的________混 匀，放在－20 ℃的冰箱中保存一年。 解析：(1)大肠杆菌属于原核细胞，题中生产纤维素酶的菌种 属于真菌，是真核细胞构成的生物。大肠杆菌与真菌结构最主要 的区别是没有被核膜包被的成形的细胞核。(2) 纤维素酶是一种复 合酶，其中 C1 和 CX 酶可使纤维素分解为纤维二糖，葡萄糖苷酶 可将纤维素二糖分解成葡萄糖。(3)只有在固体培养基上才能生长， 形成菌落，达到鉴别的目的，故在制备鉴别纤维素分解菌的培养 基时需要添加琼脂成为固体培养基。制备培养基时加入刚果红， 培养所得菌落周围出现透明圈，可初步判断该菌落为纤维素分解 酶。(4)纤维素分解菌在生态系统中属于分解者，可以加强生态系 统中物质循环(物质循环和能量流动)。(5)为了保持所获得菌种的纯 净，需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏，将菌种接种在斜面 固体培养基上，放入 4 ℃冰箱中可保藏 3～6 个月；若要长期保存， 可将菌液与灭菌的甘油混匀，放在－20 ℃的冰箱中保存一年。 答案：(1)大肠杆菌没有以核膜为界限的细胞核 (2)C1、CX 葡萄糖苷 (3)只有在固体培养基上才能生长，形成菌落，达到鉴别的目 的 透明圈 (4)物质循环(物质循环和能量流动) (5)固体斜面 甘油 13．[2019·武汉市钢城第四中学高二期中]尿素是一种重要的 农业肥料，需经细菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤 中的微生物种类和数量繁多，下列是从土壤中分离分解尿素细菌 的有关问题，请分析回答： (1)上图是利用________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐 步________到培养基的表面。 (2)下面是两种培养基配方 表 1：A 培养基配方 KH2PO4 Na2HP O4 MgSO4· 7H2O 葡萄 糖 尿素 琼脂 H2O 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g 1 000 mL 表 2：B 培养基配方 纤维 素粉 NaNO 3 Na2HP O4· KH2P O4 MgSO4 · KCl 酵母 浸膏 H2O 7H2O 7H2O 5 g 1 g 1.2 g 0.9 g 0.5 g 0.5 g 0.5 g 1000 mL ①配制培养基的操作步骤________(用字母顺序回答)。 a．倒平板 b．计算 c．溶化 d．称量 e．灭菌 ②通常培养基采用________________灭菌，在制备固体培养 基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置，目的是 ______________________________________________。 ③如 果 要 分 离 土 壤 中 能 分 解 尿 素 的 细 菌 ， 应 选 择 上 述 ________(A、B)配方的培养基，在该培养基中加入________指示 剂，可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。 ④据 B 培养基的成分，所培养微生物的同化作用类型是 ________________。 解析：(1)由图可知，主要利用平板划线法进行微生物接种， 把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。(2)①配制培养基的操作 步骤为：计算各组分配比→称量→加水溶解→高温灭菌→倒平板， 故本题正确答案为 bdcea。②通常培养基采用高压蒸汽法灭菌，在 制备固体培养基的倒平板操作时，平板冷凝后，应将平板倒置， 否则培养皿内壁上出现的冷凝水可能污染培养基。③如果要分离 土壤中能分解尿素的细菌，应选择富含尿素的培养基，即 A 培养 基。在该培养基中加入酚红指示剂，可以检测是否有脲酶的分泌， 可初步鉴定出该种细菌能否分解尿素。④因为 B 培养基中有酵母 浸膏，可以为微生物生长提供能量，所培养微生物的同化作用类 型为异养型。 答案：(1)平板划线 稀释(分散、分离) (2)①bdcea ②高压蒸汽灭菌法 防止培养皿内壁上出现 的冷凝水污染培养基 ③A 酚红 ④异养型 14．[2019·辽宁高二期末]请回答下面与微生物培养和应用有 关的问题： (1)微生物培养过程中，获得纯净培养的关键是防止________ 的入侵，对微生物的接种工具，如接种环、接种针等通常采用的 灭菌方法是__________。 (2)常用的微生物接种方法有 2 种，其中__________方法常用 于微生物的计数，运用该方法计数的结果往往比活菌的实际数目 ________。 (3)农作物秸杆中含有大量的纤维素，利用微生物可以将纤维 素转化为酒精以供人类所需。将纤维素转化为酒精需要先将纤维 素转化为葡萄糖，将纤维素转化为葡萄糖的酶是一种复合酶，它 包括 C1 酶、________和______________，将葡萄糖转化为酒精的 微生物是________(填“真核”或“原核”)生物。 (4)下表是分离某种微生物的培养基配方： 成分 MgSO 4 葡萄 糖 X 物 质 蒸馏水 琼脂 用量 5 g 10 g 7 g 1 000 mL 20 g 表中 X 物质最可能作为该培养基的________，培养基中添加 琼脂的作用是________。 解析：(1)在微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是防 止外来杂菌的入侵；对微生物的接种工具，如接种环、接种针等 通常采用灼烧灭菌法。(2)常用的微生物接种方法有平板划线法和 稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法方法常用于微生物的计数。 由于两个或多个细菌连在一起时，培养基上只能观察到一个菌落， 因此运用该方法计数的结果往往比活菌的实际数目低。(3)纤维素 酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即 C1 酶、CX 酶和葡萄糖苷酶，酵母菌能够将葡萄糖转化为酒精，酵母菌属于 真核生物。(4)培养基的成分包括碳源、氮源、水和无机盐，分析 表格成分可知，表中 X 物质最可能作为该培养基的氮源，培养基 中添加琼脂是作为凝固剂，使液体培养基变成固体培养基。 答案：(1)外来杂菌 灼烧灭菌法 (2)稀释涂布平板法 低(少、小) (3)CX 酶 葡萄糖苷酶 真核 (4)氮源 作为凝固剂，使液体培养基变成固体培养基 15．[2019·河南高三开学考试]如图所示为从土壤中分离、纯 化和扩大培养某种微生物的流程图。回答下列问题： (1)称量土样时，土壤________(填“需要”或“不需要”)进行 消毒和灭菌。 (2)进行梯度稀释操作时，若待稀释菌液取 1 mL，注入 9 mL 的无菌水，则该 1 mL 待稀释菌液被稀释了________倍。 (3)平板浇注法分离指的是将 1 mL 稀释的样品放于空白的无 菌培养皿之后，将冷却到 45 ℃～50 ℃的培养基倒入，轻摇混匀、 凝固，然后放于恒温箱中培养。从土壤中分离酵母菌和醋酸菌时， 可 以 使 用 平 板 浇 注 法 的 是 ________ 次 ， 其 理 由 是 ________________________________。 (4)划线纯化阶段，应对图示培养皿进行划线时接种环取菌液 ________次，该培养皿划线完成时接种环共需进行灼烧灭菌 ________次。 (5)扩大培养阶段，所用培养基是________(填“液体”或“固 体”)培养基。 解析：(1)要从土壤中分离相关的微生物，所以不需要对土壤 进行消毒和灭菌。(2)若待稀释菌液取 1 mL，注入 9 mL 的无菌水， 则相当于稀释了 10 倍。(3)酵母菌平板浇注会使部分菌体埋入培养 基中，酵母菌是兼性厌氧型生物，可以在低氧甚至无氧环境下生 存繁殖，而醋酸菌是需氧生物，不能在无氧条件下生存，故从土 壤中分离酵母菌和醋酸菌时，只需使用 1 次平板浇注法。(4)划线 纯化阶段，图中只有一个培养皿，接种环取一次菌液即可，接种 之前对接种环需要进行一次灼烧灭菌处理，图中共划了 5 个区， 每个区划线后均需进行灼烧灭菌，故共灼烧 6 次。(5)扩大培养常 用液体培养基进行培养，增加微生物的数量。 答案：(1)不需要 (2)10 (3)1 酵母菌平板浇注会使部分菌体埋入培养基中，酵母菌是 兼性厌氧型生物，可以在低氧甚至无氧环境下生存繁殖 (4)1 6 (5)液体 16．[2019·广东高二期末]幽门螺杆菌是人体胃内唯一能产生 大量脲酶分解尿素的细菌。下表是某实验小组培养幽门螺杆菌所 用培养基的配方。请分析回答下列问题： 成分 添加量 KH2PO4 1.4 g NaH2PO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g 尿素 1.0 g A 15.0 g 蒸馏水 定容至 1 L (1)表所示培养基中，A 所表示的成分是________，从功能上 讲，该培养基属于________。 (2)分离培养细菌时必须进行无菌操作，对培养基进行灭菌要 用________法。 (3)将幽门螺杆菌接种到 pH 适宜的该培养基中，最常用的接 种方法有________________和平板划线法。 (4)某小组采用平板划线法分离该细菌，在第二次及以后的划 线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是 ________________________________________________________ ________________。 (5)在上述以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示 剂，幽门螺杆菌菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解 产生的氨导致 pH 升高，使指示剂产生颜色变化。菌落周围红色环 带越大，表明该菌株________________。 解析：(1)该培养基为固体培养基，A 表示琼脂。该培养基以 尿素为唯一氮源，属于选择培养基。(2)需要用高压蒸汽灭菌法对 培养基进行灭菌处理。(3)常用的接种方法有稀释涂布平板法和平 板划线法。(4)为了将聚集的菌体逐渐稀释以便获得单个菌落，故 利用平板划线法分离该细菌时，在第二次及以后的划线时，总是 从上一次划线的末端开始划线。(5)由于尿素被分解产生的氨导致 pH 升高，使指示剂产生颜色变化，故在培养基中加入酚红指示剂， 幽门螺杆菌菌落周围会出现红色环带。尿素分解菌利用尿素的能 力越强，菌落周围红色环带越大。 答案：(1)琼脂 选择培养基 (2)高压蒸汽灭菌 (3)稀释涂布平板法 (4)将聚集的菌体逐渐稀释以便获得单个菌落 (5)酚红 利用(分解)尿素的能力越强 17．[2019·宁夏高二期末]尿素是一种高浓度氮肥且长期施用 没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才 能被植物吸收利用。分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化 尿素水解。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克 土壤样品中活菌数目，培养基配方如下： KH2P Na2HP MgSO4· 蛋白 葡萄 尿素 琼脂 O4 O4 7H2O 胨 糖 1.4 g 2.1 g 0.2 g 1.0 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g (1)根据培养基的成分判断，该同学________(填“能”或“不 能 ”) 分 离 出 土 壤 中 分 解 尿 素 的 细 菌 ， 其 原 因 是 ________________________________。 (2)接种前要对培养基进行________。在整个微生物的分离和 培养中，一定要注意在________条件下进行。 (3)一位同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连 成一片，最可能的原因是________________，应当怎样操作才可 以避免此种现象？________________________________。 (4)获取分解尿素的细菌后，如要临时保存，可将其接种在 ________培养基上，等长成菌落后放在 4 ℃的冰箱中保存。若要 长期保存，可以采用________的方法。 解析：(1)由图中培养基的配方可知，该培养基中能提供氮源 的是蛋白胨和尿素，尿素不是唯一氮源，不能利用尿素的菌可以 以蛋白胨为氮源生长，所以不能分离出分解尿素的菌。(2)微生物 筛选与分离成功的关键是无菌操作，因此，接种前要对培养基进 行灭菌，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件 下进行。(3)培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液没有 梯度稀释，浓度过高；要避免此种现象，需要对菌液进行梯度稀 释。(4)获取分解尿素的细菌后，如要临时保存，可将其接种在固 体斜面培养基上，等长成菌落后放在 4 ℃的冰箱中保存。若要长 期保存，可以采用甘油管藏的方法。 答案：(1)不能 培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源 (2)灭菌 无菌 (3)菌液浓度过高 对菌液进行梯度稀释(加大稀释倍数) (4)固体斜面 甘油管藏 18．[2019·云南昆一中官渡学校高二期中]下表是某研究小组 配制的适合尿素分解菌生长的培养基，请回答下列问题： KH2PO4 1.4 g Na2HPO4 2.1 g MgSO4·7H2O 0.2 g 葡萄糖 10.0 g 尿素 1.0 g 琼脂 15 g 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至 1 000 mL (1)上述培养基 的成分中，为尿素分解 菌提供碳源的是 ________，提供氮源的是________。该培养基从物理状态上看， 属于________培养基；从功能上看，属于________培养基。配制 培养基时，灭菌与调 pH 的先后顺序是________。 (2)当样品的稀释度足够高时，培养基表面可生长出一个菌落， 此菌落来源于________________，此时平板上的菌落数较能准确 的反映样品中的活菌数。 (3)培养过程中，常选择菌落数在________区间的平板统计计 数 。 统 计 的 菌 落 数 往 往 比 活 菌 的 真 实 数 目 低 ， 其 原 因 是 ________________________________________________________ ____________。 (4)尿素分解菌经 X 射线照射后不能正常生长，添加某种维生 素 后 才 能 正 常 生 长 ， 其 原 因 是 ______________________________________________。 解析：(1)该培养基中为尿素分解菌提供碳源的是葡萄糖，提 供氮源的是尿素；从物理状态上看，该培养基属于固体培养基； 从功能上看，该培养基属于选择培养基。配置培养基时，为了避 免杂菌污染，应该先调 pH 再灭菌。(2)当样品稀释度足够高时， 培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，此 时通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中的活菌数。(3)为 了保证结果准确，一般选择菌落数在 30～300 的平板进行计数； 即使样品稀释度足够高，但仍有可能两个或多个细菌细胞连到一 起，而此时平板上观察到的只是一个菌落，因此统计的菌落数往 往比活菌的真实数目低。(4)根据题意分析，尿素分解菌经 X 射线 照射后不能正常生长，添加某种维生素后才能正常生长，可能是 因为 X 射线照射导致尿素分解菌发生基因突变，从而缺少合成某 种维生素必需的酶所致。 答案：(1)葡萄糖 尿素 固体 选择 先调 pH 再灭菌 (2)样品稀释液中的一个活菌 (3)30～300 两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是 一个菌落 (4)X 射线照射导致尿素分解菌发生基因突变，从而缺少合成 某种维生素必需的酶