【生物】2019届一轮复习人教版专题84动物细胞融合与单克隆抗体教案

【生物】2019届一轮复习人教版专题84动物细胞融合与单克隆抗体教案

‎1．动物细胞融合 ‎（1）原理：细胞膜的流动性。‎ ‎（2）融合方法：聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。‎ ‎（3）意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能，也为制造单克隆抗体开辟了新途径。‎ ‎2．单克隆抗体 ‎（1）制备过程 ‎（2）优点：特异性强、灵敏度高，可大量制备。‎ ‎（3）用途：作为诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物。‎ 考向 单克隆抗体的制备过程分析 ‎1．关于下面制备单克隆抗体过程示意图的叙述，不正确的是 A．①表示已免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的 B．②促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导 C．④中的筛选是通过抗原—抗体反应进行的 D．⑤可以无限增殖 ‎【参考答案】A 限增殖又能产生单一抗体。‎ 解题技巧 制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的 项目 第一次筛选 第二次筛选 筛选 原因 诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞 筛选 方法 用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、 “瘤瘤”细胞)都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)能生长 用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群 筛选 目的 得到杂交瘤细胞 得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 ‎2．单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可以大量制备，已被广泛应用于疾病的诊断和治疗。用H7N9病毒制备单克隆抗体的流程如下图所示：‎ ‎（1）过程③常用的方法是_________________________。‎ ‎（2）向小鼠体内注射抗原蛋白，使小鼠产生________免疫。从小鼠体内分离的细胞Ⅰ是___________________________，细胞Ⅱ应具有的特点是____________________________。‎ ‎（3）体外培养细胞Ⅱ，首先应保证其处于______________________________的环境中，其次需要提供充足的营养和适宜的温度。培养箱充入二氧化碳的作用是______________________。‎ ‎（4）对于转基因成功的细胞Ⅱ还要进行克隆化培养和__________________检测。‎ ‎（5）若要预防H7N9禽流感，可用图中的______________作为疫苗。‎ ‎【答案】（1）显微注射技术　‎ ‎（2）体液(只答特异性不可)　 B淋巴细胞(浆细胞或已免疫的B淋巴细胞)　 既能无限增殖，又能产生特异性抗体　‎ ‎（3）无菌、无毒(缺一不可)　 维持培养液的pH　‎ ‎（4）(专一)抗体 ‎（5）抗原蛋白 原蛋白作为疫苗。学科%网 ‎1．关于动物细胞融合的说法，不正确的是 A．动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 B．动物细胞融合后形成的具有原来两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞 C．常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射等 D．细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能 ‎2．利用细胞工程的方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是 A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B．体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C．将等量浆细胞和骨髄瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D．利用该单克隆抗体可诊断出SARS病毒的感染者 ‎3．通过细胞工程生产单克降抗体时，通常要经过三次筛选：‎ ‎①选出能产生抗体的B淋巴细胞 ‎②在特定培养基中筛选杂交瘤细胞 ‎③选出能产生特定抗体并能大量增殖的细胞群。这三个过程的先后顺序是 A．②①③ B．①②③‎ C．①③② D．③②①‎ ‎4．下列关于单克隆抗体制备步骤的叙述，错误的是 A．将抗原注入小鼠体内，用来获得能产生相应抗体的B淋巴细胞 B．用纤维素酶和果胶酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D．筛选杂交瘤细胞，经克隆化培养后选出能产生所需抗体的细胞群[来源:]‎ ‎5．某实验室做了如图所示的实验研究，下列与实验相关的叙述正确的是 A．过程①导入的诱导基因使成纤维母细胞发生基因突变 B．丙细胞既能持续分裂，又能分泌单一的抗体 C．过程②属于动物细胞培养过程中的原代培养 D．过程③④所用的培养基中都含有聚乙二醇 ‎6．下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列说法不正确的是 A．单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的 B．活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程 C．在治疗中，应先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物导弹 D．单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害 ‎7．下图是单克隆抗体制备流程的示意图。下列有关叙述正确的是 A．从小鼠脾脏中获得细胞①主要参与细胞免疫 B．过程②利用细胞膜选择透过性原理 C．细胞③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 ‎8．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图。相关叙述正确的是 A．①过程所用的促融方法与植物体细胞杂交完全相同 B．③过程以抗HCG单克隆抗体为抗原进行检测 C．应给小鼠多次注射HCG，以获得较多的记忆细胞 D．④过程需要添加抗生素等物质，以防止病毒污染 ‎9．人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员进行研究。‎ ‎（1）科研人员以Myo作为抗原免疫小鼠，取小鼠的脾脏细胞与_________细胞诱导融合。用_________培养基筛选融合细胞，得到杂交瘤细胞。‎ ‎（2）将得到的杂交瘤细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再进行抗体阳性检测并多次重复上述操作，多次重复该过程的目的是筛选获得抗Myo抗体______的杂交瘤细胞。‎ ‎（3）双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图：‎ 固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的_________结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是_________。‎ ‎（4）研究人员获得三种抗Myo单克隆抗体，分别记为A、B、C。为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行_________组实验，检测并比较各组实验的_________。[]‎ ‎10．2013年4月16日国家卫生和计划生育委员会公布，全国共报告人感染H7N9禽流感确诊病例77例，其中16人已死亡，禽流感再度备受关注。医学界正在致力于研究预防H7N9禽流感病毒的疫苗和单克隆抗体。科学家决定采用基因敲除术将小鼠的Ig基因敲除，代之以人的Ig基因，然后用H7N9病毒去免疫小鼠，再经杂交瘤技术即可产生大量完全人源化抗体。如图是某科研机构的实验方案。请回答：‎ ‎（1）此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的__________细胞，经技术处理后的该细胞，再重新植入小鼠脾脏中增殖。[来源:]‎ ‎（2）小鼠B淋巴细胞用B表示，小鼠骨髓瘤细胞用A表示，在培养液中，用灭活的动物病毒作促融剂，培养液中共有__________种类型的融合细胞（只考虑两两融合）‎ ‎（3）第一次筛选是选出____________________型的细胞（用字母组合表示），筛选具体方法是在培养基中加入某种物质，抑制骨髓瘤细胞DNA的复制，而B细胞DNA复制虽不受影响，但增殖能力很有限，只有杂交瘤细胞可以借助B细胞DNA复制的途径，继续增殖。此种培养基称为____________________培养基。‎ ‎（4）将能产生抗H7N9病毒的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养，其培养液与植物组织培养的MS培养基相比，特有成分是______________________________。‎ ‎（5）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了____________________杂交技术。‎ ‎（6）有人设想，能否利用经H7N9病毒免疫后的小鼠效应T细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞，大量生产单克隆干扰素，用于H7N9禽流感患者的有效治疗。你觉得该方法_______________（填“可行”或“不可行”），因为______________________________。‎ ‎11．（2017·江苏卷）牛雄性胚胎中存在特异性H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是 A．H-Y 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B．应选用原肠胚做雌雄鉴别 C．鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D．用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体 ‎1．【答案】C C错误；细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，克服远缘杂交不亲和的障碍，D正确。‎ ‎2．【答案】D ‎【解析】单克隆抗体是由单个的杂交瘤细胞经过增殖而形成的遗传信息相同的大量细胞产生的化学性质单一、特异性强的抗体，所以用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体不属于单克隆抗体， A错误；浆细胞不能增殖，体外培养单个浆细胞不能获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体，B错误；将等量浆细胞和骨髄瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞中，只有浆细胞和骨髄瘤细胞融合后形成的细胞才属于杂交瘤细胞，C错误；利用该单克隆抗体能够与抗原特异性结合的原理，可诊断出SARS病毒的感染者，D正确。‎ ‎3．【答案】B 获得单克隆抗体，故这三个过程的先后次序是①②③，故选B。学&科网 ‎4．【答案】B ‎【解析】向小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的可以产生特定抗体的B淋巴细胞，A正确；用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞，B错误；用聚乙二醇或灭活的病毒作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，C正确；筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体，D正确。‎ ‎5．【答案】B ‎【解析】外源基因的导入过程属于基因重组，A错误；丙细胞能产生单克隆抗体，说明丙细胞具有连续分裂且能分泌单一抗体的能力，B正确；②表示细胞分化过程，C错误；③是诱导细胞融合的过程，所用的培养基含有聚乙二醇，而④过程不用聚乙二醇，D错误。‎ ‎6．【答案】C ‎【解析】单克隆抗体是由骨髓瘤细胞和B细胞融合形成的杂交瘤细胞合成和分泌的，A正确。活化的阿霉素可抑制DNA和RNA的合成，即DNA的复制和转录过程，B正确。根据图形信息可知阿霉素的活化需要生物导弹携带的碱性磷酸酶，所以在治疗中，应先注射生物导弹再注射非活化磷酸阿霉素，但不能间隔时间太长，因为没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除，C错误。单克隆抗体具有特异性强，灵敏度高、可大量制备的特点，根据特异性强这一特点，单克隆抗体在该过程中是针对肿瘤细胞的，所以能减轻阿霉素对正常细胞的伤害，D正确。‎ ‎7．【答案】D ‎【解析】①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞，参与体液免疫，A错误；在动物细胞融合的过程中，利用细胞膜的流动性，B错误；效应B细胞与骨髓瘤细胞进行融合，只考虑两两融合会有三种结果：杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、B细胞自身融合细胞等，只有杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生特异性抗体，C错误；④过程表示用抗体阳性检测，筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞，D正确。‎ ‎8．【答案】B ‎9．【答案】（1）骨髓瘤 选择[来源:]‎ ‎（2）产量大、纯度高 ‎（3）不同部位（表位） 与待测抗原结合；酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量 ‎（4）6 产物量 ‎【解析】（1）根据题意分析，准备单克隆抗体时应该取小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，再用选择培养基筛选融合细胞，得到杂交瘤细胞。（2）经过多次重复筛选获得的是抗Myo抗体产量大、纯度高的杂交瘤细胞。（3）据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合；酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量。（4）根据题意，为检测A、B、C中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行6组实验，检测并比较各组实验的产物量。‎ ‎10．【答案】（1）B淋巴 ‎（2）3‎ ‎（3）AB 选择 ‎（4）动物血清或血浆 ‎（5）抗原—抗体 ‎（6）不可行 骨髓瘤细胞是效应T细胞要攻击杀死的靶细胞，两者不可能融合成杂交瘤细胞 继续增殖。此种培养基称为选择培养基。（4）将能产生抗H7N9病毒的杂交瘤细胞在动物培养液中进行培养，其培养液与植物组织培养的MS培养基相比，特有成分是动物血清或血浆。（5）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了抗体—抗原杂交技术。（6）由于骨髓瘤细胞是效应T细胞要攻击杀死的靶细胞，两者不可能融合成杂交瘤细胞，所以不能利用经H7N9病毒免疫后的小鼠效应T细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞。‎ ‎11．【答案】D ‎【解析】单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌，A错误；做雌雄性别鉴别应选择囊胚期的滋养层细胞，B错误；由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药，则鉴别后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎没有意义，C错误；H-Y抗原免疫母牛，使其体内产生体液免疫，产生相应的浆细胞，获得相应抗体，D正确。‎