2020生物同步导学提分教程人教选修一测试：专题5DNA和蛋白质技术　水平测试

2020生物同步导学提分教程人教选修一测试：专题5DNA和蛋白质技术　水平测试

专题 5 水平测试 时间：90 分钟 满分：100 分 一、选择题(每小题 2 分，共 40 分) 1．在提取 DNA 的过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是( ) A．不易破碎 B．减少 DNA 的损失 C．增加 DNA 的含量 D．容易涮洗 答案 B 解析 DNA 容易吸附在玻璃容器上，所以在提取过程中为了减少 DNA 的损 失，最好使用塑料烧杯和试管。 2．在 DNA 粗提取和鉴定的实验中，若选择实验材料为植物细胞，破碎细胞 时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入食盐的目的是( ) A．利于 DNA 的溶解 B．分离 DNA 和蛋白质 C．溶解细胞膜 D．分解蛋白质 答案 A 解析 食盐的主要成分是NaCl，破碎植物细胞时所用的NaCl溶液有利于DNA 溶解，从而使 DNA 被提取出来。 3．下列关于 DNA 粗提取与鉴定的说法正确的是( ) A. NaCl 溶液的浓度越低，DNA 的溶解度越大 B．人的血液不可替代鸡血进行该实验 C．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂 D．利用 DNA 易溶于酒精的特点可除去 DNA 中的部分杂质 答案 B 解析 人是高等哺乳动物，其成熟的红细胞中没有细胞核，不能进行该实验， B 正确；NaCl 溶液浓度小于 0.14 mol/L 时，溶液的浓度越低，DNA 的溶解度越大， 等于 0.14 mol/L 时，DNA 的溶解度最小，A 错误；柠檬酸钠的作用是抗凝血，C 错误；DNA 不能溶于酒精，D 错误。 4．在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，如果实验材料是植物细胞，需要加入 洗涤剂并搅拌。下列相关说法正确的是( ) A．加入洗涤剂是为了溶解细胞膜和核膜 B．要快速搅拌产生泡沫以加速细胞膜的溶解 C．先加入洗涤剂，搅拌和研磨后再加入食盐 D．加入洗涤剂是为了清洗植物细胞表面的污垢 答案 A 解析 提取植物材料中的 DNA 时，需在切碎的组织中加入一定量的洗涤剂和 食盐。加入洗涤剂的目的是溶解细胞膜和核膜，以利于 DNA 的释放，同时要进行 充分地搅拌和研磨，使 DNA 完全释放。搅拌时应轻缓、柔和，避免产生大量泡沫， 以利于后续操作。 5．下列关于 DNA 粗提取与鉴定的说法正确的是( ) A．洗涤剂能瓦解细胞膜，同时也能控制 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度 B．在探究洗涤剂对植物细胞 DNA 提取的影响实验中，自变量是洗涤剂和植 物细胞 C．常温下，DNA 遇二苯胺被染成蓝色 D．将滤液放在 60～75 ℃的恒温水浴箱中保温 10～15 分钟能去除滤液中的杂 质，其原理是利用了 DNA 和蛋白质对高温耐受性的不同 答案 D 解析 洗涤剂能瓦解细胞膜，但不能控制 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度，A 错误；在探究洗涤剂对植物细胞 DNA 提取的影响实验中，自变量是是否加洗涤剂， B 错误；DNA 与二苯胺溶液混合，在沸水浴条件下呈现蓝色，C 错误；蛋白质在 高温下容易变性，将滤液放在 60～75 ℃的恒温水浴箱中保温 10～15 分钟能去除 滤液中的蛋白质杂质，D 正确。 6．下表有关“DNA 的粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂，不正确的 是( ) 相关操作 选取的试剂 A 破碎鸡血细胞 蒸馏水 B 溶解核内 DNA 2 mol/L NaCl 溶液 C 提取杂质较少的 DNA 冷却的 95%的酒精 D DNA 的鉴定 双缩脲试剂 答案 D 解析 破碎鸡血细胞的方法是用蒸馏水使其吸水涨破，A 正确；加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液，其目的是溶解 DNA，过滤除去不溶的杂质，B 正确；加入冷却的 95%的酒精，目的是使 DNA 析出，C 正确；DNA 的鉴定需要加入二苯胺，在沸水 浴条件下产生蓝色反应，D 错误。 7．下列有关凝胶色谱法的叙述，不正确的是( ) A．凝胶色谱法是根据分子大小分离蛋白质的有效方法 B．目前经常使用的凝胶有交联葡聚糖和琼脂糖等 C．大分子物质后被洗脱出来，小分子物质先被洗脱出来 D．凝胶色谱法的原理是不同大小的分子所经的路径不同而得以分离 答案 C 解析 相对分子质量较小的蛋白质由于容易进入凝胶颗粒内部而使所经过的 路程较长；相对分子质量较大的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面，在颗粒之间迅速 通过。因此，大分子物质先被洗脱出来，小分子物质后被洗脱出来。 8．下列关于电泳的说法正确的是( ) A．电泳是指不带电的分子在电场的作用下发生迁移的过程 B．电泳的过程要在一定的 pH 下，所以一定要使用缓冲液 C．葡聚糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳是两种常用的电泳方法 D．聚丙烯酰胺凝胶电泳中，在凝胶中加入十二烷基磺酸钠(SDS)，电泳的迁 移率主要取决于分子所带电荷的多少和相对分子质量的大小 答案 B 解析 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程，A 错误；最常用 的电泳方法是琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳，C 错误；在聚丙烯酰胺凝胶 电泳的过程中，为了消除电荷对迁移率的影响，可在凝胶中加入十二烷基磺酸钠 (SDS)，SDS 可以与各种蛋白质形成蛋白质—SDS 复合物，SDS 所带负电荷量远超 过蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同蛋白质之间的电荷差别，使电泳迁 移率完全取决于分子的大小，D 错误；电泳过程要在一定的 pH 条件下进行，所以 要在溶液中加入缓冲液，以维持溶液 pH 的稳定，B 正确。 9．有关缓冲溶液的说法不正确的是( ) A．缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液 pH 的影响，维持 pH 基本不变 B．缓冲溶液通常由 1～2 种缓冲剂溶解于水中配制而成 C．调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同 pH 范围内使用的缓冲液 D．生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的 pH 下进行的 答案 A 解析 缓冲溶液通常由 1～2 种缓冲剂溶解于水中配制而成，B 正确；调节缓 冲剂的使用比例就可以制得在不同 pH 范围内使用的缓冲液，C 正确；在一定范围 内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液 pH 的影响，维持 pH 基本不变，超过 一定范围，缓冲溶液就起不到这样的作用了，A 错误。 10．下列关于红细胞的洗涤过程错误的是( ) A．低速短时间离心，如 500 r/min 离心 2 min B．离心后用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆 C．将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入五倍体积的蒸馏水 D．重复洗涤三次直至上清液不再呈现黄色，表明红细胞已洗涤干净 答案 C 解析 洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白，采集的血样要及时分离红细胞，分 离时采用低速短时间离心，如 500 r/min 离心 2 min，然后用胶头吸管吸出上层透 明的黄色血浆，将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯，再加入五倍体积的生理盐 水，缓缓搅拌 10 min，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至上清液中没有 黄色，表明红细胞已洗涤干净。 11．有关透析的叙述中，错误的是( ) A．用于透析的薄膜要具有选择透过性 B．透析膜一般是用硝酸纤维素制成的 C．透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内 D．透析可用于更换样品的缓冲液 答案 A 解析 透析袋一般是用硝酸纤维素制成的，它没有生物活性，故不具有选择 透过性(活的生物膜才具有选择透过性)，A 错误，B 正确；透析袋能使小分子物质 自由进出，而将大分子保留在袋内，C 正确；透析可以去除样品中相对分子质量较 小的杂质，或用于更换样品的缓冲液，D 正确。 12．下列关于凝胶色谱柱的操作，不正确的是( ) A．在装填凝胶柱时，不得有气泡产生 B．在操作过程中，不能让洗脱液流干 C．样品洗脱结束后，及时倒掉色谱柱中的凝胶 D．干的凝胶要用蒸馏水充分溶胀后，才能装填 答案 C 解析 已装填好的凝胶柱可重复多次使用，在使用过程的间隔，要用蒸馏水 保持凝胶湿润。 13．凝胶色谱法分离蛋白质的实验中，样品的加入和洗脱的叙述正确的是 ( ) A．直接加入 1 mL 透析后的样品 B．加样前要使缓冲液缓慢下降全部流出 C．如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功 D．洗脱时可以用缓冲液也可以用清水 答案 C 解析 加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下 降到与凝胶面平齐，关闭出口之后，用吸管小心地将 1 mL 透析后的样品加到色谱 柱的顶端。洗脱只能用缓冲液而不能用清水。 14．如图表示对某蛋白质溶液进行 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的结果(相似于 纸层析法分离色素)，下列相关叙述不正确的是( ) A．蛋白质上某些基团解离后可使蛋白质带电，电场中带电的蛋白质分子(或 多肽)会向着与其所带电荷相反的电极移动 B．蛋白质在 SDS—聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度完全取决于其所带电荷多少 C．蛋白质在 SDS—聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度完全取决于其分子的大小 D．电泳结果表明溶液中蛋白质可能有两种，但也可能只有一种 答案 B 解析 蛋白质具有可解离的基团，在一定的 pH 下，使其带正电或负电，在电 场中发生迁移，A 正确；SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳所加的 SDS 可完全掩盖蛋白 质本身所带电荷，故其移动速度与本身所带电荷多少无关，而由其分子大小决定， B 错误，C 正确；SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳会使蛋白质解聚成单链，故结果所示 可能只有一种蛋白质(有两种单链)，也可能有两种蛋白质，D 正确。 15．以下对 DNA 和血红蛋白的提取与分离(鉴定)实验的分析正确的是( ) A．都要用猪血细胞来做实验 B．在 DNA 的粗提取与鉴定实验中，有两次 DNA 析出，所依据的原理相同 C．在实验中都要进行除杂处理以便得到较纯净的 DNA 或血红蛋白 D．将析出的 DNA 溶解在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中，加入二苯胺试剂后呈现蓝 色 答案 C 解析 猪的红细胞中无细胞核，不能用以提取 DNA，A 错误；提取 DNA 时， 第一次析出 DNA 是利用 DNA 在 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中的溶解度低的原理，第 二次则是利用 DNA 不溶于冷酒精的原理，B 错误；DNA 遇二苯胺要沸水浴加热 溶液才能变蓝，D 错误。 16．在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，可以将 DNA 滤液放在 60～75 ℃的 恒温水浴箱中保温 10～15 min，这样处理的目的是( ) A．利用 DNA 对高温的耐受性，长期保存 DNA B．利用 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度受温度影响，使 DNA 析出 C．利用 DNA 和蛋白质对高温的耐受性不同，使蛋白质变性，从而与 DNA 分离 D．利用蛋白质对高温的耐受性比 DNA 强，使 DNA 和蛋白质分离 答案 C 解析 由于蛋白质在高温条件下易变性，而 DNA 对高温的耐受性较强，因此 在 60～75 ℃的恒温水浴箱中保温 10～15 min，可使蛋白质变性，从而把蛋白质除 去，得到较纯的 DNA。 17．如图为“DNA 的粗提取与鉴定”实验的相关操作。对这些操作的目的， 叙述正确的是( ) A．①是洗涤血细胞，去除血细胞表面的杂质 B．②是溶解 DNA，去除不溶于酒精的杂质 C．③是溶解 DNA，去除不溶于 2 mol/L 的 NaCl 溶液的杂质 D．④是稀释 NaCl 溶液，去除不溶于低浓度 NaCl 溶液的杂质 答案 C 解析 ①是释放核物质，②是提纯 DNA，去除溶于酒精的杂质，④是稀释 NaCl 溶液，析出 DNA，去除溶于低浓度 NaCl 溶液的杂质。 18．下列关于蛋白质的提取与分离的叙述正确的是( ) A．在凝胶色谱柱内，分子量较大的蛋白质路程较长，但移动速度较快 B．从凝胶色谱柱中最后分离出来的是分子量较小的蛋白质 C．蛋白质的纯化使用最多的方法是 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法 D．分离血红蛋白溶液时，离心管的第三层是脂类物质 答案 B 解析 在凝胶色谱柱内，分子量大的蛋白质不能进入凝胶内，路程短，移动 速度快，而分子量小的蛋白质会进入凝胶内，路程长，移动速度慢，最后洗脱出 来的是分子量较小的蛋白质，A 错误，B 正确；SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳法是蛋 白质纯度鉴定使用最多的方法，C 错误；分离血红蛋白溶液时，离心管中将出现四 层，其中第三层就是血红蛋白溶液，第二层是脂溶性物质的沉淀层，D 错误。 19．下列有关 DNA 和蛋白质提取的叙述，正确的是( ) A．DNA 粗提取的原理是 DNA 不溶于酒精，而其他物质易溶于酒精 B．常利用甲基绿在 40 ℃水浴加热的条件下对 DNA 进行鉴定 C．血红蛋白的释放需要用到蒸馏水和甲苯 D．常利用凝胶色谱法做分离纯化后的蛋白质的纯度鉴定 答案 C 解析 DNA 粗提取利用了 DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同，而 DNA 进行纯化可利用 DNA 不溶于酒精，而其他物质易溶于酒精这一原理，A 错 误；常利用二苯胺作为鉴定 DNA 的试剂，DNA 与二苯胺在沸水浴条件下显蓝色， B 错误；血红蛋白的释放需要用到蒸馏水和甲苯，C 正确；常利用 SDS—聚丙烯酰 胺凝胶电泳做分离纯化后的蛋白质的纯度鉴定，D 错误。 20．下列有关血红蛋白的提取的叙述，错误的是( ) A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可以防止红细胞破裂 B．电泳只是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异导致迁移速度不同来 分离蛋白质 C．血红蛋白的提取和分离一般按照“样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定” 的顺序进行 D．缓冲液量远多于血红蛋白溶液量有利于杂质分子充分地向外扩散 答案 B 解析 电泳法利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的 大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子 的分离。 二、非选择题(每小题 12 分，共 60 分) 21．回答下列有关“DNA 的粗提取与鉴定”实验的问题。 (1)下图为该实验过程中的一些重要操作示意图。 ①正确的操作顺序是____________________________________。 ②上图 C、E 步骤都加入蒸馏水，但其目的不同，分别是________________ 和___________________________。 ③图 A 步骤中所用酒精必须经过________才能使用，该步骤的目的是 _______________________________________________________。 (2)为鉴定 A 中所得到的丝状物的主要成分为 DNA，可滴加________试剂，在 沸水浴条件下，如果出现________，则该丝状物的主要成分为 DNA。 答案 (1)①C→B→E→D→A ②加速血细胞的破裂 降低NaCl溶液的浓度， 使 DNA 析出 ③充分预冷 提取含杂质较少(或较纯净)的 DNA (2)二苯胺 蓝色 解析 (1)①分析题图可知，图中 DNA 粗提取的一般操作顺序是：C 向鸡血细 胞中加入蒸馏水，红细胞吸水涨破释放细胞核物质→B 过滤获取含有 DNA 的滤液 →E 过滤除去溶液中的杂质后，加蒸馏水降低氯化钠溶液的浓度，使 DNA 析出 →D 用物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶解 DNA→A 冷却的酒精进一步纯化 DNA。 ②C 加入蒸馏水的目的是使细胞吸水涨破，释放细胞核物质；E 步骤加蒸馏水 是降低 NaCl 溶液的浓度，使 DNA 析出。 ③图中 A 步骤中所用酒精必须是经过充分冷却才能使用，该步骤的目的是获 取含杂质较少(或较纯净)的 DNA。 (2)鉴定 A 中所得到的丝状物的主要成分为 DNA，可滴加二苯胺试剂，在沸水 浴加热的条件下，如果出现蓝色，则该丝状物的主要成分为 DNA。 22．“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，A、B、C、D、E 五个小组除下表中 所列处理方法不同外，其他操作步骤均相同，而且正确，但实验结果却不同。 (1) 实 验 材 料 选 择 错 误 的 组 别 是 ________ ， 其 原 因 是 ____________________________。 (2)实验步骤(不包括实验材料)均正确，但得不到 DNA 的组别是________。 (3)沸水浴中试管颜色变蓝的组别是________；蓝色较淡的是________，其原 因是____________________________________________________________。 (4)B 组实验不成功的最主要原因是_______________________________。 答案 (1)C、D 人的血浆中没有细胞结构，成熟的红细胞中没有细胞核，选 用这些材料得不到 DNA 或得到的 DNA 很少 (2)C (3)A、E A 冷却的酒精对 DNA 的凝集效果较佳，A 组使用的是 25 ℃的酒 精 (4)菜花细胞在蒸馏水中不能被破坏，得不到 DNA(应加入一定的洗涤剂和食 盐，采用研磨的方法) 解析 (1)人的血浆中没有细胞结构，成熟的红细胞没有细胞核，在这些材料 中是不能得到 DNA 或都很少。 (2)C 组中使用的试剂及操作都正确，但因材料选择的错误，不能提取到 DNA。 (3)冷酒精对 DNA 有较好的凝集效果，而 A 组中用的是 25 ℃酒精。 (4)菜花细胞外有细胞壁起保护作用，在蒸馏水中不会破裂，所以不能得到 DNA，应加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分地搅拌和研磨。 23．动物血液常常被选作提取 DNA 和提取血红蛋白的实验材料，请回答下列 有关问题： (1)提取 DNA 和提取血红蛋白，猪血都是适宜材料吗？ _________________________________________________________。 原因是_________________________________________________。 (2)无论是提取 DNA 还是提取血红蛋白，都需要先用________对红细胞进行洗 涤，其目的是___________________________________________。 (3)电泳是分离鉴定蛋白质的常规方法。下图为几种蛋白质通过 SDS—聚丙烯 酰胺凝胶电泳的图谱，据图，你认为相对分子质量最大的蛋白质是________，依 此推理该样品在凝胶色谱法中最后流出的蛋白质应该是________。 答案 (1)猪血是提取血红蛋白的适宜材料，不是提取 DNA 的适宜材料 猪成 熟的红细胞没有细胞核 (2)生理盐水 去除血浆蛋白(或杂蛋白) (3)γ球蛋白 清蛋白 解析 (1)猪血是提取血红蛋白的适宜材料，不是提取 DNA 的适宜材料，因为 猪成熟的红细胞没有细胞核，提取 DNA 可用鸡血。 (2)提取 DNA 和血红蛋白，需要先用生理盐水对红细胞进行洗涤，其目的是去 除血浆蛋白(或杂蛋白)。 (3)图为 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的图谱，γ球蛋白离点样处最近，说明相对 分子质量最大，清蛋白离点样处最远，说明相对分子质量最小；在凝胶色谱法中 相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶颗粒内部的通道，路程长，移动速度慢； 而相对分子质量大的蛋白质无法进入凝胶颗粒内部，只能在凝胶外部移动，路程 较短，移动速度快，所以最后流出的蛋白质应该是相对分子质量最小的清蛋白。 24．某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中 初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下： 实验准备 配制缓 冲液、血细 胞悬液 → 样品处理 洗涤、破 碎、离心等 → 蛋白质 粗分离 透析 → 纯化、纯度鉴 定凝胶色谱 法、电泳等 请回答下列有关问题： (1)样品处理中红细胞的洗涤要用________反复冲洗、离心。向红细胞悬液中 加入一定量的低浓度 pH＝7.0 的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞 的原理是____________________________________________________。 (2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是__________________________，若要 尽快达到理想的透析效果，可以____________________________(写出一种方法)。 (3)电泳利用了待分离样品中各种分子的__________________________等的差 异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。 (4)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血 症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有________种血红蛋白， 从分子遗传学的角度作出的解释是_________________________________。 答案 (1)生理盐水'渗透原理(或当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细 胞吸水涨破) (2)除去小分子杂质'增加缓冲液的量(或及时更换缓冲液) (3)带电性质以及分子大小、形状 (4)2'携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋 白质 解析 (1)洗涤红细胞所用的溶液是生理盐水，根据渗透作用原理，将红细胞置 于低渗溶液中，红细胞会吸水涨破，释放出血红蛋白。 (2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是除去样品中的小分子杂质；可通过增 加缓冲液的量或及时更换缓冲液等方法缩短透析时间，能尽快达到理想的透析效 果。 (3)由于各种分子带电性质以及分子大小、形状等的差异，在电泳过程中产生 了不同的迁移速度，实现各种分子的分离。 (4)根据图示可知，镰刀型细胞贫血症的携带者含有两种血红蛋白，原因是携 带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因，分别控制合成两种不同的蛋白质。 25．下面是某研究小组开展的“猪血白蛋白的提取及分子量测定”研究，请 协助完成有关问题。 材料仪器：新鲜猪血、低速冷冻离心机、透析袋、电泳仪等。 化学试剂：pH 为 7.4 的缓冲溶液、柠檬酸钠、奈氏试剂(与 NH ＋ 4 反应出现黄 色或红棕色沉淀)、饱和(NH4)2SO4 溶液、生理盐水等。 实验步骤： (1)样品获取：向新鲜猪血中加入________，静置一段时间后取上层血浆。 (2)盐析法粗提蛋白质： ①向血浆中加入一定体积的饱和(NH4)2SO4 溶液，使(NH4)2SO4 的浓度达到 50%，充分混合后静置、离心，取沉淀物。 ②向沉淀物中加入适量生理盐水使之溶解，再向其中加入一定体积的饱和 (NH4)2SO4 溶液，使(NH4)2SO4 的浓度达到 33%，充分混合后静置、离心，取沉淀 物。 ③重复步骤①②2～3 次，最后用生理盐水将沉淀溶解，即得粗提品。 盐析粗提血浆白蛋白的主要原理是___________________________， 重复步骤①②的主要目的是_____________________________________。 (3)透析除盐：将粗提品装入透析袋，以 pH 为 7.4 的缓冲液作透析液。每隔 4 h 更换一次透析液，每次更换前利用奈氏试剂检测透析液中 NH ＋ 4 的量。利用缓冲液 作 透 析 液 的 目 的 是 ____________________ 。 检 测 中 ， 若 观 察 到 透 析 液 ________________________时，即可终止透析。 (4)凝胶色谱法分离：透析后的样品经凝胶柱洗脱，获得纯净血浆白蛋白样品。 (5)蛋白质鉴定：化学物质 SDS 能使蛋白质变性，解聚成单条肽链。在聚丙烯 酰胺凝胶电泳中加入一定量的 SDS，电泳迁移率完全取决于分子大小。如图为本 实验中用 SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定血浆白蛋白的结果。根据电泳结果，某 同学得出“提取的血浆白蛋白含有两条肽链”的结论，这种说法________(填“可 靠”或“不可靠”)，理由是________________________________。 答案 (1)(适量的)柠檬酸钠 (2)血浆白蛋白在 50%和 33%的(NH4)2SO4 溶液中溶解度低 除去更多的杂质 蛋白 (3)防止 pH 变化对蛋白质结构的影响 不出现黄色或红棕色沉淀 (5)不可靠 只能得出提取的血浆白蛋白含有两种大小不同的肽链，不一定是 两条 解析 (1)样品获取：向新鲜猪血中加入(适量的)柠檬酸钠以防止血液凝固，静 置一段时间后取上层血浆。 (2)盐析法粗提蛋白质：分析实验步骤可知，盐析粗提“血浆白蛋白”的主要 原理是该血浆白蛋白在 50%和 33%的(NH4)2SO4 溶液中溶解度低，重复步骤①②的 主要目的是除去更多的杂质蛋白。 (3)利用缓冲液作透析液的目的是维持 pH 的相对稳定，防止 pH 变化对蛋白质 结构造成破坏，检测中，若观察到透析液不出现黄色或红棕色沉淀时，说明小分 子杂质已去除干净，即可终止透析。 (5)由题图只能得出提取的血浆白蛋白含有两种大小不同的肽链，而不一定是 只有两条。