高考生物复习：基因工程高考题

高考生物复习：基因工程高考题

专题1、基因工程 ‎（2011年江苏卷）33．（8分）请回答基因工程方面的有关问题：‎ ‎(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。 图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。‎ ‎①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为 ▲ 。‎ ‎②在第 ▲ 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。‎ ‎(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。‎ ‎ ①第1组： ▲ ； ②第2组： ▲ 。‎ ‎(3) PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的 功能，这是因为 ▲ 。‎ ‎(4)用限制酶EcoRV、Mbol单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1 kb ‎ 即1000个碱基对)，请在答题卡的指定位置画出质粒上EcoRV、Mbol的切割位点。‎ ‎ 33．（8分）‎ ‎ (1)①15/16 ②三 ‎ (2)①引物I和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效 ‎ ②引物I’自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效 ‎(3) DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结 ‎ 合到双链DNA片段的引物链上 ‎(4)见右图 ‎（11年北京卷）31.（16分）‎ T-DNA可能随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植物形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子（称为T1代）。‎ ‎（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除 ，因为后者产生的 ‎ 会抑制侧芽的生长。‎ ‎（2） 为筛选出已转化的个体，需将T代播种在含 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T代）。‎ ‎（3） 为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T代播种在含 的培养基上，获得所需个体。‎ ‎（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与 植株进行杂交，再自交 代后统计性状分离比。‎ ‎（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。‎ ‎（6）根据T-DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。‎ 其过程是：提取 植株的DNA，用限制酶处理后，再用 将获得 的DNA片段连接成环（如右图）以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链 DNA片断中选取 作为引物进行扩增，得到的片断将用于获取该基因的全序列信息。‎ 答案：31（16分）‎ ‎（1）顶芽 生长素 ‎（2）（一定浓度的）除草剂 ‎（3）（一定浓度的）盐 ‎（4）野生型 1‎ ‎（降低 ‎（6）突变体 DNA连接酶 B、C ‎（2011年安徽卷）31.（21分）Ⅱ.（9分）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。‎ ‎(1)进行转基因操作前，需用___________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。‎ ‎(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。‎ ‎(3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。‎ ‎(4)利用生物反应器培养家蚕细胞时，的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。‎ 答案：（1）胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） （2）启动子 终止子 （3）TaqDNA聚合酶 对干扰素基因特异性的DNA引物对 （4）增大细胞贴壁生长的附着面积 解析：考查的知识点为动物细胞培养和基因工程.‎ ‎(1)为了使组织分散开为单个细胞通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶。‎ ‎(2)启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端。‎ ‎(3)PCR反应体系的主要成分应扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA 、TaqDNA聚合酶、两种引物。‎ ‎(4)细胞离体培养时通常表现出：贴壁生长和接触抑制，多孔的中空薄壁小玻璃珠能增大贴壁生长的附着面积，增加培养的细胞数量.‎ ‎（11天津理综卷）6、某致病基因h位于X染色体上，该基因和正常基因H中的某一特定序列BclI酶切后，可产生大小不同的片段（如图1，bp表示碱基对），据此可进行基因诊断。图2为某家庭病的遗传系谱。‎ 下列叙述错误的是 A h基因特定序列中Bcl 1酶切位点的消失是碱基序列改变的结果 B II-1的基因诊断中只出现142bp片段，其致病基因来自母亲 C II-2的基因诊断中出现142bp，99bp和43bp三个片段，其基因型为XHXh D II-3的丈夫表现型正常，其儿子的基因诊断中出现142bp片段的概率为1/2.‎ 答案：D ‎（11年四川卷）5.北极比目鱼中有抗冻基因，其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是 A过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序 B多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白，‎ C过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选 D应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达 答案：B 解析：过程1获得的目的基因已不含非编码区和内含子，因此不能用于比目鱼基因组测序，因此A错。导入农杆菌是为了扩增和更易导入蕃茄细胞，C错。DNA探针技术不能检测基因是否完全表达，目的基因的完全表达应该检测表达产物蛋白质，D错。‎ ‎（2011年浙江卷）6、ada（酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是 ‎ A. 每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 ‎ B. 每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 ‎ C. 每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada ‎ D. 每个人的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 答案：C ‎（2011海南生物卷）31.[生物——选修3：现代生物科技专题]（15分）‎ 回答有关基因工程的问题：‎ （1） 构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_平__末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____（相同，不同）粘性末端的限制酶。‎ （2） 利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是提供RNA聚合酶特异性识别结合位点，驱动基因转录。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为DNA—RNA分子杂交。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成胰岛素原（蛋白质）_，常用抗原-抗体杂交技术。‎ （3） 如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的T—DNA_中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体_上。‎ ‎（2011上海生命科学卷）（九）回答下列有关基因工程的问题。（10分）‎ ‎57．基因工程中使用的限制酶，其特点是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。‎ 答案：特异性地识别和切割DNA（1分）‎ 下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。‎ ‎58．将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X－1混合连接，连接后获得的质粒类型有＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（可多选）‎ A．X－1‎ B．X－2‎ C．X－3‎ D．X－4‎ 答案：ABC（2分）‎ ‎59．若将上图所示X－1、X－2、X－3、X－4四种质粒导入大肠杆菌，然后分别涂布在含有青霉素或四环素的两种培养基上。在这两种培养上均不能生长的大肠杆菌细胞类型有＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿。‎ 答案：无质粒细胞（1分） 含X—3的细胞（1分）‎ ‎60．如果X－1用E1酶切，产生850对碱基和3550对碱基两种片段：那么质粒X－2（Tcr基因的长度为1200对碱基）用E2酶切后的片段长度为＿＿＿＿＿＿＿＿＿对碱基。‎ 答案：4750（2分）‎ ‎61．若将外源的Tcr基因两端用E2切开，再与用E2切开的X－1混合连接，并导入大肠杆菌细胞，结果显示，含X－4的细胞数与含X－1的细胞数之比为13，增大DNA连接酶用量能否提高上述比值？＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。‎ 原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。‎ 答案：不能（1分） DNA连接酶对DNA片段没有选择性/两段DNA末端相同（1分）‎ ‎（11年重庆卷）31. （16分）拟南芥是遗传学研究的模式植物，某突变体可用于验证相关的基因的功能。野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）,下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因(Tn)功能的流程示意图。‎ ‎（1）与拟南芥t基因的mRNA相比，若油菜Tn基因的mRNA中UGA变为ＡＧＡ，其末端序列成为“－ＡＧＣＧＣＧＡＣＣＡＧＡＡＣＵＣＵＡＡ”，则Tn比ｔ多编码　　　　　个氨基酸（起始密码子位置相同，ＵＧＡ、ＵＡＡ为终止密码子）。‎ ‎（２）图中①应为　　　　　。若②不能在含抗生素Ｋａｎ的培养基上生长，则原因是 .若③的种皮颜色为 ，则说明油菜基因与拟南芥T基因的功能相同。‎ ‎（3）假设该油菜基因连接到拟南芥染色体并替换其中一个t基因，则③中进行减数分裂的细胞在联会时的基因为 ；同时，③的叶片卷曲（叶片正常对叶片卷曲为显性，且与种皮性状独立遗传），用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交，其后代中所占比列最小的个体表现为 ；取③的茎尖培养成16颗植珠，其性状通常 （填 不变或改变）。‎ ‎（4）所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥 （填是或者不是）同一个物种。‎ 答案：31.（16分）‎ ‎（1）2‎ ‎（2）重组质粒（重组DNA分子） 重组质粒未导入 深褐色 ‎（3）TnTntt； 黄色正常、黄色卷曲； 不变 ‎（4）是 解析：‎ 通过对基因工程和遗传知识相结合来考查学生对该部分知识的掌握，属中档题，较难。‎ 油菜Tn基因的mRNA中UGA变为AGA，而末端序列为“——AGCGCGACCAGACUCUAA——”，在拟南芥中的UGA本是终止密码子不编码氨基酸，而在油菜中变为AGA可编码一个氨基酸，而CUC还可编码一个氨基酸，直到UAA终止密码子不编码氨基酸。‎ 假设油菜Tn基因连接到拟南芥染色体并替换其是一个t基因，注意拟南芥是指实验有的突变体tt，所以③转基因拟南芥基因型为Tnt，减数分裂联会时形成四分体是由于染色体进行了复制，基因也进行了复制，因而基因型为TnTnt t。‎ 设③转基因拟南芥的叶片卷曲与正常叶是由B、b基因控制，正常叶为显性，而该对性状与种皮性状为独立遗传，则这两对性状遵循基因的分离与自由组合定律。则：‎ ‎③转基因拟南芥 ╳ 双杂合拟南芥 Tntbb TtBb 进行逐对分析：Tnt╳Tt 1/4TnT 、 1/4Tnt、1/4 Tt 、1/4tt 由于Tn和T的功能相同，所以表示为3/4T--（深褐色）、1/4tt（黄色）‎ bb╳Bb 1/2 Bb（正常叶）、1/2 bb（卷曲叶）‎ 所以后代中有四种表现型；‎ ‎3/8种皮深褐色正常叶；3/8种皮深褐色卷曲叶 ‎1/8种皮黄色正常叶；1/8种皮黄色卷曲叶 取③转基因拟南芥的茎尖培养为植物组织培养为无性生殖，所以后代性一般不变。（排除基因突变）‎ 由上可知所得③转基因拟南芥Tnt和野生型拟南芥TT两个品种相当于发生基因突变，没有隔离，能杂交产生可育后代，因此是同一个种。‎ 此套题难度不大，考查识记的偏多，理解推理分析较少，而填空题中类似判断题型的填空又多，降低了难度，而不能很好考查学生能力，区分度不明显。‎ ‎（11年广东卷）27.（16分）‎ ‎ 登革热病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人时将病毒传染给人，可引起病人发热、出血甚至休克。科学家用以下方法控制病毒的传播。‎ ‎（1）将S基因转入蚊子体内，使蚊子的唾液腺细胞大量表达S蛋白，该蛋白可以抑制登革热病毒的复制。为了获得转基因蚊子，需要将携带S基因的载体导入蚊子的 ‎ 细胞。如果转基因成功，在转基因蚊子体内可检测出 、 和 。‎ ‎（2）科学家获得一种显性突变蚊子（AABB）。A、B基因位于非同源染色体上，只有A或B基因的胚胎致死。若纯合的雄蚊（AABB）与野生型雌蚊（aabb）交配，F1群体中A基因频率是 ，F2群体中A基因频率是 。‎ ‎（3）将S基因分别插入到A、B基因的紧邻位 置（如图11），将该纯合的转基因雄蚊释放 到野生群体中，群体中蚊子体内病毒的 平均数目会逐代 ，原因是 。‎ ‎27、答案：（1）受精卵 S基因、由S基因转录的mRNA S蛋白 ‎ （2）50% 60%‎ ‎ （3）减少 S基因表达的S蛋白会抑制登革热病毒复制 ‎（11年山东卷）35.（8分）【生物—现代生物科技专题】‎ ‎ 人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。‎ ‎（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可以从处死的雌鼠________中获取。‎ ‎（2）图中的高血压相关基因作为__________，质粒作为_________,二者需用________切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有________有关。 ‎ ‎（3）子代大鼠如果________和__________，即可分别在水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。‎ ‎（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是___________、早期胚胎培养和胚胎移植。‎ 答案：（1）卵巢 ‎（2）目的基因 载体 同种限制性核酸内切酶（或同种限制酶）‎ ‎ 限制酶切割位点 ‎（3）检测到体内有相关蛋白 出现高血压 ‎（4）体外受精 专题一基因工程 江苏卷18．下列关于转基因植物的叙述。正确的是 A．转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传人环境中 B．转抗虫基因的植物．不会导致昆虫群体抗性基因撷宰增加 C．动物的生长激素基因转人植物后不能表达 D．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题 ‎【答案】A ‎【解析】本题考查了转基因技术的安全性问题。转入到油菜的基因，可以通过花粉传入环境中，A项正确；由于植物与害虫间是相互选择的，转抗虫基因植物可使昆虫群体抗性基因频率增加，B项错误；动物生长素基因转入植物后也能表达，C项错误；转基因技术的安全性问题，要通过验证才能得到证实，D项错误。‎ 上海卷综18．运用转基因技术培养的单细胞“工程硅藻”，可把光合作用合成的有机物以脂质形式储存起来。科学家计划在海水中大量培养“工程硅藻”，捕捞后从中提炼“生物柴油”。与矿物柴油相比，使用这种“生物柴油”的优点是 （ A ）‎ ‎ ①可再生   ② 不显著增加碳排放 ‎ ‎ ③不排放含硫废气 ④ 不会对生态环境造成负面影响 ‎ A．①②③    B．①③④ C．①②④   D．②③④‎ 全国二5、下列叙述符合基因工程概念的是 A、B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B、将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C、用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D、自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 答案B 解析：基因工程是人为转基因的过程。A为细胞工程C为人工诱变D为自然基因重组。‎ 浙江卷2．在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是(A)[来‎ A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 ‎ B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 ‎ C．将重组DNA分子导入烟草原生质体 ‎ D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 福建卷32. [生物一现代生物科技专题](10分) 。‎ 红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白．可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图 ‎(1)图中①所指的是 技术。‎ ‎(2)图中②所指的物质是 ，③所指的物质是 。‎ ‎(3)培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。‎ ‎(4)检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 ‎ 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。‎ 答案：（1）PCR （2）mRNA rhEPO （3）培养液 （4）杂交瘤 解析：本题主要以人红细胞生成素生产为材料来考查基因工程和细胞工程中动物细胞培养技术、制备单克隆抗体技术。获取目的基因的方法有四种（从基因文库中获取、用PCR扩增技术、用反转录法、用化学合成法）由图以核DNA为模板获得目的基因的方法可知①为PCR技术。进行反转录的模板是mRNA。由题意可知重组CHO细胞适用于生产重组人红细胞生成素(rhEPO），所以重组CHO细胞能过表达出重组人红细胞生成素(rhEPO）或者红细胞生成素。培养动物细胞是用液体培养基——即培养液，细胞从培养液中吸收营养，并同时向培养液中排放代谢废物，当代谢废物积累时会危害细胞，因此要不断更新培养液。制备单克隆抗体是让淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，然后由杂交瘤细胞来分泌抗体。‎ 江苏卷27．（8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图甲、图乙中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：‎ ‎ （1）一个图甲所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。‎ ‎ （2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。‎ ‎ （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 。‎ ‎ （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。‎ ‎ （5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。‎ ‎ （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。‎ ‎ （7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。‎ ‎【答案】（1）0、2‎ ‎（2）高 ‎（3）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 ‎（4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 ‎（5）DNA连接 ‎（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞 ‎（7）蔗糖为唯一含碳营养物质 ‎【解析】本题考查基因工程的限制性内切酶的作用特点 （1） 质粒切割前是双链环状DNA分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团。从图1可以看出，质粒上只含有一个SmaⅠ的切点，因此被改酶切割后，质粒变为线性双链DNA分子，因每条链上含有一个游离的磷酸基团，因此切割后含有两个游离的磷酸基团。‎ （2） 由题目可知，SmaⅠ识别的DNA序列只有G和C，而G和C之间可以形成三个氢键，A和T之间可以形成二个氢键，所以SmaⅠ酶切位点越多，热稳定性就越高 （3） 质粒抗生素抗性基因为标记基因，由图2可知，标记基因和外源DNA目的基因中均含有SmaⅠ酶切位点，都可以被SmaⅠ破坏，故不能使用该酶剪切含有目的基因的DNA （4） 只使用EcoR I，则质粒和目的基因两端的粘性末端相同，用连接酶连接时，会产生 质粒和目的基因自身连接物，而利用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ剪切时，质粒和目的基因两端的粘性末端不同，用DNA连接酶连接时，不会产生自身连接产物。‎ ‎（5）质粒和目的基因连接后获得重组质粒，该过程需要连接酶作用，故混合后加入DNA连接酶。‎ ‎（6）质粒上的抗性基因为标记基因，用于鉴别和筛选含有重组质粒的受体细胞。‎ ‎（7）将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体后，含有重组质粒的个体才能吸收蔗糖，因此可利用蔗糖作为唯一碳源的培养基进行培养受体细胞，含有重组质粒的细胞才能存活，不含有重组质粒的因不能获得碳源而死亡，从而达到筛选目的。‎ 天津卷7.（26分）‎ ‎ Ⅰ.（14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。‎ 据图回答：‎ ‎（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。‎ ‎（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 （填字母代号）。‎ A.启动子 B. tetR C.复制原点 D. ampR ‎（3）过程①可采用的操作方法是 （填字母代号）。‎ A.农杆菌转化 B. 大肠杆菌转化 C.显微注射 D. 细胞融合 ‎（4）过程②可采用的生物技术是 。‎ ‎（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的 性。[来源:Z*xx*k.Com]‎ ‎（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 （填字母代号）技术。‎ A.核酸分子杂交 B. 基因序列分析 C.抗原—抗体杂交 D. PCR 答案（26分）‎ Ⅰ.（14分）[来源:学,科,网]‎ （1） HindⅢ和BamHⅠ；氨苄青霉素 （2） A （3） C （4） 胚胎移植技术 （5） 全能 （6） C 思路分析：I（1）据图，仅将人乳铁蛋白基因切割出来，需要在人乳铁蛋白基因的左侧用BanHI切割，右侧用HindIII切割。当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后，TETR基因被人乳铁蛋白基因隔开，不是完整的，而anpR基因是完整的，所以筛选含有重组载体的大肠肝菌首先需要字含氨苄青霉素的培养基上进行。‎ ‎（2）基因表达的调控序列在启动子上。‎ ‎（3）将重组质粒导入动物细胞，常采用显微镜的方法。‎ ‎（4）过程②的左侧是早期胚胎，右侧是代孕牛，过程②采用的生物技术是胚胎移植。‎ ‎（5）将细胞培养为个体，利用了细胞的全能性。‎ ‎（6）检测目的基因在手提细胞中是否表达，常采用抗原-抗体杂交技术。‎ 上海（七）分析有关基因表达的资料，回答问题。（9分）‎ 取同种生物的不同类型细胞，检测其基因表达，结果如右图。‎ ‎45. 基因1～8中有一个是控制核糖体蛋白质合成的基因，则该基因最有可能是基因 。‎ ‎46. 图所示细胞中功能最为近似的是细胞 。‎ A.1与6 B.2与5 C.2与3 D.4与5 ‎ ‎47. 判断图中细胞功能近似程度的依据是 。‎ ‎48. 现欲研究基因1和基因7连接后形成的新基因的功能，导入质粒前，用限制酶切割的正确位置是 。‎ ‎ ‎ ‎49. 右上图是表达新基因用的质粒的示意图，若要将新基因插入到质粒上的A处，则切割基因时可用的限制酶是 。‎ ‎ A. Hind Ⅲ B. EcoR I ‎ C. Eco B D. Pst I ‎50. 新基因与质粒重组后的DNA分子导入受体细胞的概率很小，因此需进行 ，才能确定受体细胞已含有目的基因。‎ ‎51. 在已确定有目的基因的受体细胞中，若质粒的抗青霉素基因缺失了两个碱基，将这样的受体细胞接种到含有青霉素的培养基中，该细胞中可能出现的结果是 ‎ A.抗青霉素基因不能转录 B.基因1和7没有表达 ‎ C.基因1和7不能连接 D.质粒上的酶切位置发生改变 ‎【答案】‎ ‎（七）（9分）‎ ‎45.2 46.A 47.表达的相同基因最多，差异表达的基因最少。48.B 49.C 50.筛选 ‎51.B D 专题一基因工程 ‎3. （浙江）下列关于基因工程的叙述，错误的是 ‎ A.目的基因和受体细胞均可来自动、或微生物 ‎ B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 ‎ C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 ‎ D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 ‎35．（8分）（生物一现代生物科技专题）‎ ‎ 人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：‎ 请回答：‎ ‎（1）过程①代表的是 。‎ ‎（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用 和 两种工具酶。‎ ‎（3）过程③采用的实验技术是 ，获得的X是 。‎ ‎（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。‎ ‎ 32. （福建）（10分）‎ ‎ 转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答： ‎ ‎（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶 ，对 进行切割。‎ ‎（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有 ，作为标记基因。‎ ‎（3）香蕉组织细胞具有 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 。‎ ‎ 4. （安徽2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是 A．追踪目的基因在细胞内的复制过程 B．追踪目的基因插入到染色体上的位置 C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构。‎ ‎45．（广东理科基础）钱永健先生因在研究绿色荧光蛋白方面的杰出成就而获2008年诺贝尔奖。在某种生物中检测不到绿色荧光，将水母绿色荧光蛋白基因转入该生物体内后，结果可以检测到绿色荧光。由此可知 ‎ A．该生物的基因型是杂合的 ‎ B．该生物与水母有很近的亲缘关系 ‎ C．绿色荧光蛋白基因在该生物体内得到了表达 ‎ D．改变绿色荧光蛋白基因的1个核苷酸对，就不能检测到绿色荧光 ‎34．（江苏）(7分)苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图(为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。‎ ‎ ‎ ‎ (1)将图中①的DNA用HindIII、BamH I完全酶切后，反应管中有_______种DNA片段。‎ ‎ (2)图中②表示HindIII与Bam I酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得_______种重组质粒；如果换用Bst I与BamH I酶切，目的基因与质粒连接后可获得_______种重组质粒。 ‎ ‎(3)目的基因插入质粒后，不能影响质粒的_______。‎ ‎ (4)图中③的Ti质粒调控合成的vir蛋白，可以协助带有目的基因的T—DNA导人植物细胞，并防止植物细胞中_______对T—DNA的降解。‎ ‎ (5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞_______ 。 ‎ ‎ (6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种，其目的是降低害虫种群中的_______基因频率的增长速率。‎ ‎39.（10分）现代生物科技专题 ‎（1）饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的 ，然后改变植酸酶的 ‎ ‎，从而得到新的植酸酶。‎ ‎（2）培育转植酸梅基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是 。请简述获得转基因植株的完整过程。‎ ‎（3）为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过 ‎ ‎ 转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期可通过 方法，从而一次得到多个转基因猪个体。‎ ‎（4）若这些转基因因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？‎ ‎ ‎ ‎37．（上海）(9分)人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。‎ ‎(1)目的基因的获取方法通常包括__________和_____________。‎ ‎(2)上图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改变的碱基对；这种变异被称为___________________。‎ ‎(3)已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域(见上图)，那么正常人的会被切成______个片段；而患者的则被切割成长度为______对碱基和______对碱基的两种片段。‎ ‎(4)如果某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是______(以P+表示正常基因，P-表示异常基因)。‎ ‎3、D35.（1）逆（反）转录 （2）限制性核酸内切酶（限制性内切酶、限制酶） DNA连接酶（注：两空顺序可颠倒）（3）细胞融合 杂交瘤细胞 4）A蛋白 核酸（基因）序列 抗A蛋白的单克隆抗体 ‎32（10分）（1）PstⅠ、EcoRⅠ，含抗病基因的DNA、质粒，（2）抗卡那霉素基因（3）全能性，脱分化、再分化。4、C 45、C34．(7分)(1)4 (2)2 1 (3)复制 (4)DNA水解酶 ‎ (5)表面无相应的特异性受体(6)抗性37．(9分)‎ ‎(1)从细胞中分离 通过化学方法人工合成 ‎(2)见下图 基因碱基对的替换（基因突变）(3)3 460 220(4)P+P-‎ 一 基因操作的基本内容 线性DNA分子的酶切示意图 ‎(08理综Ⅰ)4．已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如图中箭头所指，如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现在多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是 A．3 B．4 C．9 D．12‎ 答案：C ‎(08重庆)31、2007年我国科学家率先完成了家蚕基因组精细图谱的绘制，将13000多个基因定位于家蚕染色体DNA上，请回答以下有关家蚕遗传变异的问题：‎ ‎（１）在家蚕的基因工程实验中，分离基因的做法包括用　　　　　　　　　　　　　　对DNA进行切割，然后将DNA片段与　　　　　　　　　　　结合成重组DNA，并将重组DNA转入大肠杆菌进行扩增等。‎ ‎（２）家蚕的体细胞共有56条染色体，对家蚕基因组进行分析（参照人类基因组计划要求），应测定家蚕　　　　条双链DNA分子的核苷酸序列。‎ ‎（３）决定家蚕丝心蛋白H链的基因编码区有16000个碱基对，其中有1000个碱基对的序列不编码蛋白质，该序列叫　　　　　　　　　　；剩下的序列最多能编码　　　　　个氨基酸（不考虑终止密码子），该序列叫　　　　　　　　　　　。‎ ‎（４）为了提高蚕丝的产量和品质，可以通过家蚕遗传物质改变引起变异和进一步选育来完成，这些变异的来源有　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。‎ ‎（５）在家蚕遗传中，黑色（B）与淡赤色（b）是有关蚁蚕（刚孵化的蚕）体色的相对性状，黄茧（B）与白茧（b）是有关茧色的相对性状，假设这两对性状自由组合，杂交后得到的数量比如下表：‎ 黑蚁黄茧 黑蚁白茧 淡赤蚁黄茧 淡赤蚁白茧 组合一 ‎9‎ ‎3‎ ‎3‎ ‎1‎ 组合二 ‎0‎ ‎1‎ ‎0‎ ‎1‎ 组合三 ‎3‎ ‎0‎ ‎1‎ ‎0‎ ① 请写出各组合中亲本可能的基因型 组合一　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　‎ 组合二　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　‎ 组合三　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　‎ ‎②让组合一杂交子代中的黑蚁白茧类型自由交配，其后代中黑蚁白茧的概率是　　　　。‎ 答案：（１）限制酶（或限制性内切酶）；运载体（或质粒）‎ ‎（２）29‎ ‎（３）内含子；5000；外显子 ‎（４）基因突变、基因重组、染色体变异 ‎（５）‎ ‎①组合一：BbDdU(或BbDd×BbDd)‎ 组合二：Bbdd、bbdd(或Bbdd×bbdd)②‎ 组合三：BbDD、BbDd、Bbdd (或BbDD×BbDD、BbDd×BbDD、BbDD×Bbdd)‎ ‎(08山东)35．【生物－现代生物技术专题】‎ 为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。‎ ‎（1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，‎ DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）‎ ‎（2） 将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。‎ ‎（3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术。该技术的 核心是 和 。‎ ‎（4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。‎ ‎ ‎ 答案：(1)a a ‎(2)基因枪法(花粉管通道法)‎ ‎(3)植物组织培养(1分) 脱分化(去分化) 再分化 ‎(4)耐盐基因(目的基因) 一定浓度的盐水浇灌(移裁到盐碱地中)‎ ‎(08江苏生物)32．（8分）将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。‎ 请根据以上图表回答下列问题。‎ ‎（1）在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶，其最主要的特点是 。‎ ‎（2）PCR过程中退火（复性）温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列，图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度？__________。‎ ‎（3）图1步骤③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求？ 。‎ ‎（4）为将外源基因转入马铃薯，图1步骤⑥转基因所用的细菌B通常为 。‎ ‎（5）对符合设计要求的重组质粒T进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对以下酶切结果作出判断。‎ ‎①采用EcoRⅠ和PstⅠ酶切，得到_________种DNA片断。‎ ‎②采用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切，得到_________种DNA片断。‎ 答案：（1）耐高温 2）引物对B （3）否 （4）农杆菌 （5）①2 ②1‎ ‎(08广东生物)39．（现代生物科技专题，10分）‎ 天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：‎ ‎（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是 ，用 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子 ，以完成工程菌的构建。‎ ‎（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是 ，若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用 检测或将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一段时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，请解释该现象发生的原因。‎ ‎（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？‎ ‎（4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？‎ 答案：限制酶（限制性内切酶） DNA连接酶 导入受体细胞 （2）DNA分子杂交技术 抗原抗体杂交 ‎(08海南)26．（18分）（选修模块3：现代生物科技专题）‎ 图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P为启动因子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。‎ ‎（1）将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有 、 、 三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行 。‎ ‎（2）用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞接种到含四环的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是 。‎ ‎（3）目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是 ，其合成的产物是 。‎ ‎（4）在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶时 。‎ 答案：（18分）‎ ‎（1）目的基因—载体连接物 载体--载体连接物 目的基因--目的基因连接物 分离纯化（每空2分，共8分）（其他合理答案也给分） ‎ ‎（2）载体--载体连接物（2分）；目的基因--载体连接物（1分）、载体--载体连接物（1分）‎ ‎（3）启动子 mRNA（每空2分，共4分）‎ ‎（4）EcoRI和BamHI（2分）（只答一个酶不给分）‎ ‎(08山东基能)51．（1分）生物世界广泛存在着变异，人们研究并利用变异可以培育高产、优质的作物新品种。下列能产生新基因的育种方式是 A．“杂交水稻之父”袁隆平通过杂交技术培育出高产的超级稻 B．用X射线进行大豆人工诱变育种，从诱变后代中选出抗病性强的优良品种 C．通过杂交和人工染色体加倍技术，成功培育出抗逆能力强的八倍体小黑麦 D．把合成β-胡萝卜素的有关基因转进水稻，育成可防止人类VA缺乏症的转基因水稻 答案：B ‎(08上海生物)39．（9分）本题为分叉题。A题适用于《生命科学》教材，B适用于《生物》教材。A和B中任选一题，若两题都做以A给分。‎ A．以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变着人类的生活。请回答下列问题。‎ ‎（1）获得目的基因的方法通常包括 和 。‎ ‎（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是 和 。‎ ‎（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或 ，后者的形状成 。‎ ‎（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率 ，所以在转化后通常需要进行 操作。‎ ‎（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和 序列上是相同的。‎ 答案：（1）化学合成（人工合成） 酶切获取（从染色体DNA分离/从生物细胞分离） （2）限制性核酸内切酶（限制酶） DNA连接酶（连接酶） （3）质粒 小型环状（双链环状、环状） （4）低 筛选 （5）氨基酸 二 基因工程的成果与发展前景 ‎(08上海生物)23．阻止病人的致病基因传给子代的方法通常是将正常基因导入病人 A．体细胞的细胞质 B．生殖细胞的细胞质 C．体细胞的细胞核 D．生殖细胞的细胞核 答案：D 第二节 基因的结构 ‎（天津理综）1．下列关于细胞基因复制与表达的叙述，正确的是 A．一种密码子可以编码多种氨基酸 B．基因的内含子能翻译成多肽 C．编码区增加一个碱基对，只会改变肽链上的一个氨基酸 D．DNA分子经过复制后，子代DNA分子中（C+T）/（A+G）=1‎ 答案：D ‎（四川理综）31．（22）‎ ‎（1）下面是某基因的部分碱基序列，序列I为内含子的一部分，序列II为外显子的一部分。‎ 序列Ⅰ 序列Ⅱ ‎…TACGTCGACCGTCTACTG… …ATGCGGGAGGCGGATGTC…‎ ‎…ATGCAGCTGGCAGATGAC… …TACGCCCTCCGCCTACAG…‎ ‎↓ ↓‎ ‎↑ ↑‎ 上列片段所编码蛋白质的氨基酸序列为“…甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—丙氨酸—天冬氨酸—缬氨酸…”（甲硫氨酸的密码子是AUG）。‎ ‎①该基因表达过程中，RNA的合成在 中完成，此过程称为 。‎ A T ‎｜‎ C G ‎｜‎ ‎②请写出编码上述氨基酸序列的mRNA序列： 。‎ ‎③如果序列I中箭头所指碱基对 被替换为 该基因上列片段编码的氨基酸序列为：‎ C G ‎｜‎ ‎ ‎ ‎④如果序列II中箭头所指碱基对 缺失，该基因上列片段编码的氨基酸序列为：‎ ‎ ‎ 答案：（1）①细胞核 转录 ②AUG CGG GAG GCG GAU GUC ‎ ‎③…甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—丙氨酸—天冬氨酸—缬氨酸…‎ ‎④…甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—精氨酸—甲硫氨酸…‎ ‎(江苏生物)16．下图为一个真核基因的结构示意图，根据图中所示，对该基因特点叙述正确的是 ‎ A．非编码区是外显子，编码区是内含子 B．非编码区对该基因转录不发挥作用 ‎ C．编码区是不连续的 D．有三个外显子和四个内含子 答案：C 第三节 基因工程简介 一 基因工程的基本内容 二 基因工程的成果与发展前景 ‎（理综II）4．下列有关基因工程中限制内切酶的描述，错误的是 A．一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B．限制性内切酶的活性受温度的影响 C．限制性内切酶能识别和切割RNA D．限制性内切酶可从原核生物中提取 答案：C ‎（天津理综）30．（14分）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。‎ 侵 染 抗虫基因 含kan质粒 重组质粒 土壤农杆菌 含重组质粒土壤农杆菌 ‎ A 构建 导入 ‎ B 培养选择 转基因抗虫植株 再生植株 愈伤组织 离体棉花叶片组织 ‎ C 诱导选择 分化 ‎ D 检测 请据图回答：‎ ‎（1）A过程需要的酶有_______________________________________________。‎ ‎（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是____________________‎ ‎____________________________________________________________。‎ ‎（3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入________________。‎ ‎（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用________________‎ ‎________________________________________________作为探针。‎ ‎（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。‎ ‎①将转基因植株与________________________杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1：1。‎ ‎②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为________。‎ ‎③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占____________%。‎ 答案：30．（14分） （1）限制性内切酶和DNA连接酶 （2）具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存 （3）卡那霉素 （4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因 ‎（5）①非转基因植株 ②3：1 ③100‎ ‎（山东理综）35．（8分）[生物-现代生物科技专题]‎ 继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答：‎ ‎（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是 。‎ ‎（2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入 中，原因是 。‎ ‎（3）通常采用 技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。‎ ‎（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的 细胞中特异表达。‎ ‎（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的 转入 细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体。该技术称为 。‎ 答案：（1）显微注射 （2）受精卵（或早期胚胎） 受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达 （3）DNA分子杂交（核酸探针） （4）膀胱上皮 （5）细胞核 去核的卵 核移植（或克隆）‎ ‎(北京理综)2．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是 ‎ A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA C．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列 D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白 答案：D ‎(江苏生物)‎ ‎38．(8分)单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病。已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb，镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者，为了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。‎ ‎(1)从图中可见，该基因突变是由于 ‎ 引起的。巧合的是，这个位点的突变使得原 来正常基因的限制酶切割位点丢失。正常基 因该区域上有3个酶切位点，突变基因上只有 ‎2个酶切位点，经限制酶切割后，凝胶电泳分 离酶切片段，与探针杂交后可显示出不同的 带谱，正常基因显示 条，突变基因显示 ‎ 条。‎ ‎ (2)DNA或RNA分子探针要用 等标记。利用核酸分子杂交原理，根据图中突变基因的核苷酸序列(…ACGTGTT…)，写出作为探针的核糖核苷酸序列 。‎ ‎ (3)根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。这对夫妇4次妊娠的胎儿Ⅱ-l～II-4中基因型BB的个体是 ，Bb的个体是 ，bb的个体是 。‎ 答案：(1)碱基对改变(或A变成T) 2 1 ‎ ‎ (2)放射性同位素(或荧光分子等) …UGCACAA…‎ ‎ (3)Ⅱ一l和Ⅱ一4 Ⅱ一3 Ⅱ一2‎ ‎(广东生物)7．现有一长度为1000碱基对(by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶Eco R1酶切后得到的DNA分子仍是1000 by，用Kpn1单独酶切得到400 by和600 by两种长度的DNA分子，用EcoRI、Kpnl同时酶切后得到200 by和600 by两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是 答案：D